下面是一項(xiàng)“利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)人胰島素的方法”的專利摘要,請回答:本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素.所用的人胰島素基因是依據(jù)植物“偏愛”的密碼子來設(shè)計所含的密碼子,通過人工合成若干DNA片段,拼接而成,并且在胰島素-COOH端加上KDEL內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列,避免胰島素在植物細(xì)胞中的降解.將該基因置于CaMV 35S啟動子和果實(shí)專一性啟動子2A12的驅(qū)動之下通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入番茄中,在番茄的果實(shí)中表達(dá)人胰島素.
(1)本專利是采用人工合成人工合成方法獲得目的基因的.獲得的人胰島素基因與人體細(xì)胞中胰島素基因的堿基序列不同,但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同,原因密碼子具有簡并性,基因序列不同,蛋白質(zhì)可以相同密碼子具有簡并性,基因序列不同,蛋白質(zhì)可以相同.要想在體外獲得大量該目的基因的片段,可以采用PCRPCR技術(shù).該技術(shù)中使用的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定性DNA聚合酶熱穩(wěn)定性DNA聚合酶;原料是四種游離的脫氧核苷酸四種游離的脫氧核苷酸.
(2)根據(jù)上述摘要,轉(zhuǎn)基因操作時所用的載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒,載體上的T-DNAT-DNA可以轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上.構(gòu)建的基因表達(dá)載體中含有:①②③⑤⑧①②③⑤⑧(從下列選項(xiàng)中選擇).
①目的基因 ②CaMV35S啟動子 ③果實(shí)專一性啟動子2A12 ④引物 ⑤標(biāo)記基因 ⑥內(nèi)含子滯留序列 ⑦終止密碼子 ⑧終止子
(3)如果要檢測在受體細(xì)胞中是否存在目的基因可采用DNA分子雜交DNA分子雜交技術(shù).該技術(shù)中使用的基因探針也可以用來檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA.還可以從個體個體水平進(jìn)行鑒定.
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】人工合成;密碼子具有簡并性,基因序列不同,蛋白質(zhì)可以相同;PCR;熱穩(wěn)定性DNA聚合酶;四種游離的脫氧核苷酸;農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒;T-DNA;①②③⑤⑧;DNA分子雜交;目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA;個體
【解答】
【點(diǎn)評】
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