如圖是利用工程菌(大腸桿菌)生產人生長激素的實驗流程。所用的pBR322質粒含有限制酶PstⅠ、EcoR工和HindⅢ的切點各一個,且三種酶切割形成的末端各不相同,而Amp'表示氨芐青霉素抗性基因,Tet'表示四環(huán)素抗性基因。請回答以下相關問題。
(1)目的基因主要是指編碼蛋白質的基因,也可以是一些具有調控作用調控作用的因子。過程①所用到的組織細胞是人垂體組織細胞人垂體組織細胞,③過程的目的是將平末端處理為黏性末端將平末端處理為黏性末端,⑤過程常用CaCl2CaCl2溶液處理大腸桿菌。
(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ對圖中質粒進行切割,形成的DNA片段種類有99種,這些種類的DNA片段中含有完整氨芐青霉素抗性基因的DNA片段和四環(huán)素抗性基因的DNA片段分別有33種和33種。
(3)如果只用限制酶 PstⅠ切割 目的基因和質粒。完成過程(4)、(⑤)后(受體大腸桿菌不含Amp'、Tet'),將三角瓶內的大腸桿菌先接種到甲培養(yǎng)基上,形成菌落后用無菌牙簽挑取培養(yǎng)基甲上的單個菌落,分別接種到乙和丙兩個培養(yǎng)基的相同位置上,一段時間后,菌落的生長狀況如圖乙、丙所示。接種到甲培養(yǎng)基上的目的是篩選含四環(huán)素抗性基因含四環(huán)素抗性基因的大腸桿菌;接種到培養(yǎng)基乙上的大腸桿菌菌落,能存活的大腸桿菌體內導入的是完整的pBR322質粒(或含有Ampr、Tetr的質粒)完整的pBR322質粒(或含有Ampr、Tetr的質粒)。含有目的基因的大腸桿菌在培養(yǎng)基乙和丙上的生存情況是在丙中能存活,在乙中不能存活在丙中能存活,在乙中不能存活。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】調控作用;人垂體組織細胞;將平末端處理為黏性末端;CaCl2;9;3;3;含四環(huán)素抗性基因;完整的pBR322質粒(或含有Ampr、Tetr的質粒);在丙中能存活,在乙中不能存活
【解答】
【點評】
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