苯丙酮尿癥是單基因遺傳病，科學家將正常基因D導入該病患者的細胞，以治療該病。圖甲為A、B、C三種質粒，圖乙為含有目的基因D的DNA片段，圖丙為重組載體的示意圖。Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環(huán)素抗性基因，lacZ為藍色顯色基因，其表達產(chǎn)物可以將無色化合物X-gal轉化成藍色物質，使菌落呈藍色、而非白色，EcoRI（0.6Kb）、PvuI（0.8Kb）為限制酶及其切割位點與復制原點之間的距離?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程操作的核心步驟是 基因表達載體的構建基因表達載體的構建。圖甲中三種質粒適宜作為運載體的是質粒 BB，與另外兩種質粒相比，其作為載體的優(yōu)點是 有標記基因，復制原點不會被限制酶切割有標記基因，復制原點不會被限制酶切割。
（2）獲取目的基因D時應選擇乙圖中的 PvuⅠPvuⅠ對其所在的DNA進行切割。如果僅知道D基因首尾的部分核苷酸序列，根據(jù)D基因已知核苷酸序列合成 引物引物，利用PCR擴增目的基因。
（3）將目的基因D和甲圖中相應質粒連接后，得到圖丙中三種方式。為選出正向連接的重組質粒，使用 EcoRⅠEcoRⅠ對質粒單酶切后，進行電泳分析。若是正向連接載體，電泳圖譜中出現(xiàn)長度為 1.21.2Kb和 5.55.5Kb兩條帶。
（4）利用自身不含lacZ基因且對抗生素敏感的大腸桿菌作為受體細胞，要在已轉化的含重組質粒、已轉化的含空質粒的受體細胞和未轉化成功的細胞中篩選出已轉化的含重組質粒的受體細胞的方法是：在含有 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，形成 白白色菌落的為導入重組質粒的受體細胞。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因表達載體的構建；B；有標記基因，復制原點不會被限制酶切割；PvuⅠ；引物；EcoRⅠ；1.2；5.5；氨芐青霉素和X-gal；白
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：33引用：1難度：0.5
相似題
-
1．紅細胞生成素（EPO）是人體內促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團隊采用基因工程培育轉基因羊作為乳腺生物反應器，使其能合成EPO。下列有關敘述錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟作物之一，提高煙草質量有利于提高經(jīng)濟收入。我國科研團隊研究了一種轉基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結構和獲得轉基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得轉基因抗鹽煙草新品種過程中應用的生物技術有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質粒，應該選擇（填酶）切割目的基因和質粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點，如圖為某種質粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質粒中，以制備轉基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~