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螢火蟲發(fā)光是體內(nèi)熒光素酶催化一系列反應(yīng)所產(chǎn)生的現(xiàn)象。如果熒光素酶存在于植物體內(nèi),也可使植物體發(fā)光。一直以來熒光素酶的惟一來源是從螢火蟲腹部提取。但加利福尼亞大學(xué)的一組科學(xué)家成功地通過轉(zhuǎn)基因工程實現(xiàn)了將熒光素酶基因?qū)氲酱竽c桿菌體內(nèi),并在大腸桿菌體內(nèi)產(chǎn)生熒光素酶。請你根據(jù)已有的知識回答下列有關(guān)問題:
(1)在此轉(zhuǎn)基因工程中,目的基因是
熒光素酶基因
熒光素酶基因
,將目的基因和質(zhì)粒“縫合”在一起的工具酶是
DNA連接酶
DNA連接酶
。該酶據(jù)來源可以分為兩類,其中
T4-DNA連接酶
T4-DNA連接酶
既可以“縫合”黏性末端,又可以“縫合”平末端。
(2)將此目的基因?qū)氲酱竽c桿菌體內(nèi)需要載體的幫助。選取載體時必須考慮的條件是
能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標(biāo)記基因
能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標(biāo)記基因
。(至少寫出兩點)。
(3)在此基因工程中,將體外重組DNA導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi),并使其在細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存和表達(dá)的過程稱為
轉(zhuǎn)化
轉(zhuǎn)化
。最常用的方法是首先用
Ca2+
Ca2+
處理大腸桿菌得到
感受態(tài)
感受態(tài)
細(xì)胞。
(4)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,用
DNA分子雜交
DNA分子雜交
技術(shù)來檢測。目的基因是否表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì),除了通過大腸桿菌是否發(fā)光來確定外,還可以通過
抗原—抗體
抗原—抗體
特異性反應(yīng)來判斷。

【答案】熒光素酶基因;DNA連接酶;T4-DNA連接酶;能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標(biāo)記基因;轉(zhuǎn)化;Ca2+;感受態(tài);DNA分子雜交;抗原—抗體
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.目前,科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物.下列與之相關(guān)的說法,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:5引用:1難度:0.9
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進(jìn)展.
    (1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運載體結(jié)合時,必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運載體有
     
     
    、
     
    等,而作為運載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進(jìn)行篩選.進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時,通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細(xì)胞中特異性表達(dá).
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達(dá)載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
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    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱),擴增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達(dá)載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     
    。
    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細(xì)胞內(nèi),通過培養(yǎng)即可獲得能表達(dá)人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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