用DNA重組技術可以賦于生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過程中需要使用多種工具酶,其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點如圖所示。
回答下列問題:
(1)常用的DNA連接酶有E.coli DNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中 EcoRⅠ、PstⅠEcoRⅠ、PstⅠ酶切割后的DNA片段可以用E.coli DNA連接酶連接。上圖中 EcoRⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、EcoRⅤEcoRⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、EcoRⅤ酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。
(2)DMA連接酶催化目的基因片段與質粒載體片段之間形成的化學鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
(2)DNA重組技術中所用的質粒載體具有一些特征,如質粒DNA分子上有復制原點,可以保證質粒在受體細胞中能 自我復制自我復制;質粒DNA分子上有 限制酶切割位點限制酶切割位點,便于外源DNA插入;質粒DNA分子上有標記基因(如某種抗生素抗性基因),標記基因的作用是 用于重組DNA的篩選和鑒定用于重組DNA的篩選和鑒定。
(4)表達載體含有啟動子,啟動子的作用是 RNA聚合酶識別、結合并啟動轉錄的DNA片段RNA聚合酶識別、結合并啟動轉錄的DNA片段。
(5)將目的基因導入植物細胞最常用的方法是 農(nóng)桿菌轉化法農(nóng)桿菌轉化法。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】EcoRⅠ、PstⅠ;EcoRⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、EcoRⅤ;磷酸二酯鍵;自我復制;限制酶切割位點;用于重組DNA的篩選和鑒定;RNA聚合酶識別、結合并啟動轉錄的DNA片段;農(nóng)桿菌轉化法
【解答】
【點評】
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