在真核生物體內(nèi)普遍存在一種針對外源RNA的RNA沉默機(jī)制來抵御病毒的入侵，其過程主要包括：真核細(xì)胞能識別入侵病毒的RNA使其成為雙鏈RNA，經(jīng)剪切加工后，來自雙鏈RNA中的一些單鏈RNA片段（siRNA）與其他蛋白質(zhì)形成RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體（RISC），該復(fù)合體可以特異性地與病毒RNA結(jié)合并將其降解。番木瓜是嶺南四大名果之一，由于其極易受單鏈RNA的環(huán)斑病毒侵染從而導(dǎo)致減產(chǎn)。研究人員將環(huán)斑病毒（HA株系）的衣殼蛋白基因?qū)敕竟嫌鷤M織內(nèi)，獲得了首個轉(zhuǎn)基因抗病毒品種R?；卮鹣铝袉栴}。
（1）在獲取環(huán)斑病毒衣殼蛋白基因的過程中，研究人員需要從序列數(shù)據(jù)庫中獲取環(huán)斑病毒的衣殼蛋白基因序列信息，根據(jù)衣殼蛋白基因兩側(cè)保守區(qū)域設(shè)計出用于PCR反應(yīng)的 引物引物。然后從環(huán)斑病毒中提取總RNA，經(jīng) 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄后得到DNA，作為PCR反應(yīng)的 模板DNA模板DNA，最后用 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳方法鑒定PCR產(chǎn)物。
（2）當(dāng)轉(zhuǎn)基因抗病毒品種R被環(huán)斑病毒促染后，相關(guān)的siRNA通過 堿基互補(bǔ)配對堿基互補(bǔ)配對原則與病毒RNA結(jié)合，經(jīng)過 誘導(dǎo)沉默復(fù)合體（RISC）誘導(dǎo)沉默復(fù)合體（RISC）對RNA的降解，抑制病毒增殖。
（3）品種R對HA株系的環(huán)斑病毒具有良好的抗性，但對我國華南地區(qū)的其他株系的環(huán)斑病毒抗性不強(qiáng)。導(dǎo)入環(huán)斑病毒（HA株系）基因y的品種Y對不同株系環(huán)斑病毒具有更廣譜的抗性。推測與衣殼蛋白基因相比，基因y 堿基序列更加保守（即不同病毒株系的y基因序列相同），作為目的基因?qū)敕竟虾螅哂袕V泛的病毒株系抗性堿基序列更加保守（即不同病毒株系的y基因序列相同），作為目的基因?qū)敕竟虾?，具有廣泛的病毒株系抗性。
【答案】引物；逆轉(zhuǎn)錄；模板DNA；瓊脂糖凝膠電泳；堿基互補(bǔ)配對；誘導(dǎo)沉默復(fù)合體（RISC）；堿基序列更加保守（即不同病毒株系的y基因序列相同），作為目的基因?qū)敕竟虾?，具有廣泛的病毒株系抗性
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：24引用：3難度：0.5
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因，還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物，突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該P(yáng)CR擴(kuò)增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是。
（3）如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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