研究發(fā)現(xiàn),2018-2030年糖尿病患者的胰島素用量可能會增加20%,目前的胰島素產(chǎn)量不能滿足全球需求,利用生物工程生產(chǎn)人胰島素是解決該問題的主要手段。已知人胰島素基因中含有不能編碼蛋白質(zhì)的內(nèi)含子,轉(zhuǎn)錄形成的mRNA需加工(切去內(nèi)含子對應(yīng)區(qū)段)后才可翻譯;而大腸桿菌的基因中沒有內(nèi)含子,也沒有切除內(nèi)含子相應(yīng)的機制。如圖是利用基因工程生產(chǎn)人胰島素的操作示意圖?;卮鹣铝袉栴}:
(1)科研人員利用步驟①②獲得人胰島素基因,而不是從人的基因組文庫中獲得,原因是 通過步驟①②獲得的人胰島素基因中沒有內(nèi)含子,其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可以在大腸桿菌中表達出胰島素(或從人的基因組文庫中獲得的人胰島素基因中含有內(nèi)含子,其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物不能在大腸桿菌中翻譯,因此無法獲得胰島素)通過步驟①②獲得的人胰島素基因中沒有內(nèi)含子,其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可以在大腸桿菌中表達出胰島素(或從人的基因組文庫中獲得的人胰島素基因中含有內(nèi)含子,其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物不能在大腸桿菌中翻譯,因此無法獲得胰島素)。
(2)通過步驟⑤可以短時間內(nèi)獲得大量的胰島素基因,它利用的原理是 DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制。利用該技術(shù)擴增胰島素基因的條件有胰島素基因,dATP、dCTP、dTTP、dGTP、Taq(或熱穩(wěn)定DNA聚合)Taq(或熱穩(wěn)定DNA聚合)酶和引物等,其中合成引物的前提條件是要有 一段已知胰島素基因的核苷酸序列一段已知胰島素基因的核苷酸序列。
(3)步驟 ⑦⑦是基因工程的核心步驟,其目的是 使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。為確定步驟⑩獲得的人胰島素的功能活性是否與天然產(chǎn)品相同,科研人員還需進行的研究是 將步驟⑩獲得的人胰島素與天然產(chǎn)品的功能進行活性比較將步驟⑩獲得的人胰島素與天然產(chǎn)品的功能進行活性比較。
(4)科學(xué)家利用蛋白質(zhì)工程技術(shù),研制出了賴脯胰島素,與天然胰島素相比,其皮下注射后易吸收,起效快。獲得賴脯胰島素基因的途徑是:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】通過步驟①②獲得的人胰島素基因中沒有內(nèi)含子,其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可以在大腸桿菌中表達出胰島素(或從人的基因組文庫中獲得的人胰島素基因中含有內(nèi)含子,其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物不能在大腸桿菌中翻譯,因此無法獲得胰島素);DNA雙鏈復(fù)制;Taq(或熱穩(wěn)定DNA聚合);一段已知胰島素基因的核苷酸序列;⑦;使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用;將步驟⑩獲得的人胰島素與天然產(chǎn)品的功能進行活性比較;設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)
【解答】
【點評】
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