黃色鐮刀菌污染動(dòng)物飼料后會(huì)產(chǎn)生一種毒性較高的代謝產(chǎn)物--脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON),這給飼養(yǎng)的動(dòng)物及人類健康帶來(lái)巨大威脅??蒲腥藛T利用雜交瘤技術(shù)制備出抗DON的單克隆抗體,實(shí)現(xiàn)了對(duì)DON的高效低成本檢測(cè)。回答下列問(wèn)題:
(1)制備單克隆抗體時(shí),首先需用DON對(duì)小鼠進(jìn)行免疫(給小鼠注射DON)用DON對(duì)小鼠進(jìn)行免疫(給小鼠注射DON),隨后從小鼠脾臟獲得B淋巴細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所需氣體95%空氣+5%CO295%空氣+5%CO2。
(2)通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)獲得雜交細(xì)胞后,再經(jīng)過(guò)篩選獲得所需的雜交瘤細(xì)胞,該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生抗DON抗體既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生抗DON抗體。
(3)為獲得大量的單克隆抗體,可將雜交瘤細(xì)胞進(jìn)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng),從(細(xì)胞)培養(yǎng)液(細(xì)胞)培養(yǎng)液中提??;或?qū)㈦s交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔,從小鼠腹水中提取。
(4)將已知濃度帶熒光標(biāo)記DON的溶液(標(biāo)準(zhǔn)樣品)、未知濃度不帶熒光標(biāo)記DON的溶液(待測(cè)樣品)等量混合,加入事先吸附有上述單克隆抗體的固相載體中保溫一段時(shí)間,去除游離DON分子后測(cè)定固相載體的熒光值,熒光值越強(qiáng)則待測(cè)樣品中DON的濃度越低(抗體與兩種DON的結(jié)合能力相同)。得出劃線部分判斷所依據(jù)的原理是待測(cè)樣品中DON濃度越低,則標(biāo)準(zhǔn)樣品DON相對(duì)越多,與抗體結(jié)合機(jī)會(huì)越多,熒光值越大待測(cè)樣品中DON濃度越低,則標(biāo)準(zhǔn)樣品DON相對(duì)越多,與抗體結(jié)合機(jī)會(huì)越多,熒光值越大。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】用DON對(duì)小鼠進(jìn)行免疫(給小鼠注射DON);95%空氣+5%CO2;動(dòng)物細(xì)胞融合;既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生抗DON抗體;體外培養(yǎng);(細(xì)胞)培養(yǎng)液;待測(cè)樣品中DON濃度越低,則標(biāo)準(zhǔn)樣品DON相對(duì)越多,與抗體結(jié)合機(jī)會(huì)越多,熒光值越大
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:21引用:1難度:0.7
相似題
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒(méi)有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過(guò)將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7 -
3.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來(lái)制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過(guò)雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過(guò)程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長(zhǎng)春堿相比,將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
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