基因工程
長期高血糖可引發(fā)血管細胞衰老。科研人員為研究S蛋白在因高血糖引發(fā)的血管細胞衰老中的作用，以腺病毒為載體將編碼S蛋白的S基因?qū)胙芗毎?，實現(xiàn)S蛋白在血管細胞中的大量表達。腺病毒的遺傳物質(zhì)為DNA，其復制需要E1、E2、E3基因共同完成。為將S基因?qū)胂俨《?，科研人員首先構(gòu)建了含S基因的重組質(zhì)粒，過程如圖1，含S基因重組腺病毒的制作過程如圖2。
（1）科研人員將S基因先用 BamH I和EcoR IBamH I和EcoR I（填限制酶的名稱）酶切后，再用DNA連接酶連入質(zhì)粒1，得到重組質(zhì)粒Ⅰ（圖1甲所示），導入細菌后。為篩選含有重組質(zhì)粒Ⅰ的細菌，除了營養(yǎng)成分外，培養(yǎng)基還需添加 ADAD。（多選）
A.卡那霉素
B.氨芐霉素
C.DNA連接酶
D.瓊脂
（2）在上述培養(yǎng)基中長出的單菌落提取質(zhì)粒，無法確定是否含有S基因，原因是 含有質(zhì)粒I的細菌具有卡那霉素抗性，能在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生存含有質(zhì)粒I的細菌具有卡那霉素抗性，能在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生存。如要進一步鑒定重組質(zhì)粒Ⅰ是否含有S基因，下列方法可選用的是 ②②。
①測定重組質(zhì)粒Ⅰ的長度②測定重組質(zhì)粒Ⅰ堿基序列③放在青霉素培養(yǎng)基進行篩選④測定重組質(zhì)粒Ⅰ的元素
（3）重組質(zhì)粒Ⅰ長度為3.5kb（千堿基對），質(zhì)粒Ⅱ長度為5.4kb,用限制酶切重組質(zhì)粒Ⅰ獲得DNA片段，利用pmeⅠ切割將此DNA片段與質(zhì)粒Ⅱ（圖1乙所示）重組產(chǎn)生重組質(zhì)粒Ⅱ，重組質(zhì)粒Ⅱ的長度可能為 6.2kb6.2kb，原因是 重組質(zhì)粒I中只有一個Pme I切割位點，質(zhì)粒Ⅱ中有兩個Pme I切割位點，且這兩個位點大約將質(zhì)粒Ⅱ平均分成兩部分，形成的重組質(zhì)粒Ⅱ的長度約為3.5+5.42=6.2kb重組質(zhì)粒I中只有一個Pme I切割位點，質(zhì)粒Ⅱ中有兩個Pme I切割位點，且這兩個位點大約將質(zhì)粒Ⅱ平均分成兩部分，形成的重組質(zhì)粒Ⅱ的長度約為3.5+5.42=6.2kb。
（4）圖2中，將含S基因的重組質(zhì)粒Ⅱ，用PacⅠ酶切后，獲得改造后的腺病毒DNA，將其導入A細胞的目的是 復制并指導腺病毒外殼蛋白的合成，產(chǎn)生大量重組腺病毒復制并指導腺病毒外殼蛋白的合成，產(chǎn)生大量重組腺病毒，A細胞的基因必須要含有 E3E3基因。
（5）綜合上述信息，從生物安全性角度分析重組腺病毒載體的優(yōu)點：重組腺病毒只有在A細胞中才能夠復制，即使侵染其他細胞，也不能復制；重組腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上；腺病毒是人工改造的載體，不含致病基因重組腺病毒只有在A細胞中才能夠復制，即使侵染其他細胞，也不能復制；重組腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上；腺病毒是人工改造的載體，不含致病基因。
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【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BamH I和EcoR I；AD；含有質(zhì)粒I的細菌具有卡那霉素抗性，能在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生存；②；6.2kb；重組質(zhì)粒I中只有一個Pme I切割位點，質(zhì)粒Ⅱ中有兩個Pme I切割位點，且這兩個位點大約將質(zhì)粒Ⅱ平均分成兩部分，形成的重組質(zhì)粒Ⅱ的長度約為3.5+=6.2kb；復制并指導腺病毒外殼蛋白的合成，產(chǎn)生大量重組腺病毒；E3；重組腺病毒只有在A細胞中才能夠復制，即使侵染其他細胞，也不能復制；重組腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上；腺病毒是人工改造的載體，不含致病基因
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【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：14引用：2難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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