鐵皮石斛作為一種集觀賞和藥用價(jià)值于一身的重要中藥材，在人們長(zhǎng)期掠奪式采挖與生存條件的破壞下，野生資源瀕臨滅絕，藥材價(jià)格不斷攀升?，F(xiàn)利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的鐵皮石斛遺傳轉(zhuǎn)化方法，不僅能上調(diào)植物有益成分表達(dá)水平，還能增強(qiáng)其抗逆性和抗病蟲能力，同時(shí)還能控制其生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)程，以利市場(chǎng)需求。請(qǐng)回答下列問題：
（1）農(nóng)桿菌的活化培養(yǎng)：挑取農(nóng)桿菌于 液體液體（填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基中活化并擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含有0.5%氯化鈉，其作用是 調(diào)節(jié)滲透壓（調(diào)節(jié)滲透壓和提供無機(jī)鹽營養(yǎng)）調(diào)節(jié)滲透壓（調(diào)節(jié)滲透壓和提供無機(jī)鹽營養(yǎng)）。
（2）侵染石斛原球莖：挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好、顏色呈嫩綠色、質(zhì)地均勻且較為松散的原球莖置于36-45khz條件下超聲波處理1-3min,把原球莖切割為3-5mm方塊，再對(duì)其進(jìn)行 消毒消毒處理后浸入農(nóng)桿菌侵染液。該過程中超聲波和對(duì)原球莖進(jìn)行切割處理的目的是 消毒超聲波和切割處理造成球莖微損傷，有利于提高農(nóng)桿菌的感染效率消毒超聲波和切割處理造成球莖微損傷，有利于提高農(nóng)桿菌的感染效率。
（3）共培養(yǎng)和篩選：侵染結(jié)束后，用濾紙吸干原球莖上多余侵染液，然后迅速將原球莖轉(zhuǎn)移至共培養(yǎng)基培養(yǎng)；培養(yǎng)基中的蔗糖的作用是 提供碳源（提供碳源和維持滲透壓）提供碳源（提供碳源和維持滲透壓）。將共培養(yǎng)后的原球莖用 無菌水無菌水沖洗4-5次，再用濃度為480-520mg/L的頭孢溶液清洗1-2min,將原球莖用濾紙吸干水分，迅速置于篩選培養(yǎng)基中培養(yǎng)。該過程中使用頭孢類抗生素的作用是 無菌水殺滅農(nóng)桿菌及其他雜菌無菌水殺滅農(nóng)桿菌及其他雜菌。
（4）植株再生：將篩選得到的原球莖接種于篩選培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待分化出芽后轉(zhuǎn)入 生根培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)至組培苗，后要進(jìn)行煉苗操作，煉苗目的是 提高試管苗對(duì)外部環(huán)境的適應(yīng)能力提高試管苗對(duì)外部環(huán)境的適應(yīng)能力。
（5）實(shí)驗(yàn)過程中用不同種類、濃度的激素對(duì)鐵皮石斛原球莖形成愈傷組織和不定芽進(jìn)行了研究，具體的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示：
| 培養(yǎng)基號(hào) | 培養(yǎng)基（MS） | 6-BA（mg/L） | 2，4-D（mg/L） | 蔗糖（g/L） | 接種數(shù)（個(gè)） | 原球莖死亡數(shù)（個(gè)） | 誘導(dǎo)愈傷組織數(shù)（個(gè)） | 每塊愈傷不定芽數(shù)（個(gè)） |
| 1 | 12 | 0.5 | 1.2 | 30 | 30 | 5 | 25 | 3 |
| 2 | 12 | 1.0 | 1.5 | 20 | 30 | 4 | 26 | 3 |
| 3 | 12 | 1.25 | 0.8 | 25 | 30 | 3 | 27 | 11 |
| 4 | 32 | 0.5 | 1.5 | 25 | 30 | 6 | 24 | 3 |
| 5 | 32 | 1.0 | 0.8 | 30 | 30 | 4 | 26 | 7 |
| 6 | 32 | 1.25 | 1.2 | 20 | 30 | 3 | 27 | 5 |
3
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號(hào)培養(yǎng)基，判斷的依據(jù)是 接種相同數(shù)量的原球莖，原球莖死亡數(shù)低，誘導(dǎo)愈傷組織數(shù)和每塊愈傷不定芽數(shù)高
接種相同數(shù)量的原球莖，原球莖死亡數(shù)低，誘導(dǎo)愈傷組織數(shù)和每塊愈傷不定芽數(shù)高
。【答案】液體；調(diào)節(jié)滲透壓（調(diào)節(jié)滲透壓和提供無機(jī)鹽營養(yǎng)）；消毒；消毒超聲波和切割處理造成球莖微損傷，有利于提高農(nóng)桿菌的感染效率；提供碳源（提供碳源和維持滲透壓）；無菌水；無菌水殺滅農(nóng)桿菌及其他雜菌；生根培養(yǎng)基；提高試管苗對(duì)外部環(huán)境的適應(yīng)能力；3；接種相同數(shù)量的原球莖，原球莖死亡數(shù)低，誘導(dǎo)愈傷組織數(shù)和每塊愈傷不定芽數(shù)高
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/7/25 8:0:9組卷：35引用：1難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：23引用：8難度：0.7 -
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發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：39引用：10難度：0.5
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