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研究發(fā)現(xiàn)人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品??茖W(xué)家培育出轉(zhuǎn)入溶菌酶基因山羊,可大規(guī)模生產(chǎn)人溶菌酶(從乳汁中提?。?。其過程如圖所示,其中①~⑨表示過程。亮氨酸是山羊細(xì)胞維持生命活動(dòng)必不可少的一種必需氨基酸,質(zhì)粒S中的基因Leu通過控制相關(guān)酶的合成控制亮氨酸的合成,基因GFP控制合成綠色熒光蛋白。四種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見下表。請(qǐng)回答下列問題:
限制酶 BamHⅠ BglⅡ HindⅢ XbaⅠ
識(shí)別序列和切割位點(diǎn) -GGATCC- -AGATCT- -AAGCTT- -TCTAGA-
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(1)以胞內(nèi)的mRNA為模板通過反轉(zhuǎn)錄合成cDNA,將其儲(chǔ)存于受體菌群,從而構(gòu)建
cDNA文庫(部分基因文庫)
cDNA文庫(部分基因文庫)
。過程②需要的限制酶是
BamHⅠ、HindⅢ
BamHⅠ、HindⅢ
。
(2)為成功篩選出含重組質(zhì)粒T的成纖維細(xì)胞,質(zhì)粒S中用作標(biāo)記基因的是
基因Leu、基因GFP
基因Leu、基因GFP
。為達(dá)到篩選目的,培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分中不應(yīng)含有
亮氨酸
亮氨酸
。將成纖維細(xì)胞培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察,篩選出
不顯示
不顯示
(選填“顯示”或“不顯示”)綠色熒光的細(xì)胞用于過程⑤。
(3)過程④常用儀器為
顯微注射儀
顯微注射儀
。培養(yǎng)過程需對(duì)早期胚胎進(jìn)行性別鑒定和胚胎分割,性別鑒定應(yīng)取
滋養(yǎng)層
滋養(yǎng)層
(填“滋養(yǎng)層”或“內(nèi)細(xì)胞團(tuán)”)進(jìn)行SRY-PCR,篩選出雌性動(dòng)物胚胎并進(jìn)行分割,分割時(shí)應(yīng)注意
將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割
將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】cDNA文庫(部分基因文庫);BamHⅠ、HindⅢ;基因Leu、基因GFP;亮氨酸;不顯示;顯微注射儀;滋養(yǎng)層;將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:15引用:1難度:0.6
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  • 1.某種結(jié)腸癌細(xì)胞存在抑癌基因A的突變,研究人員準(zhǔn)備利用DNA重組技術(shù)將突變的抑癌基因A克隆到質(zhì)粒載體上,用于后續(xù)癌癥發(fā)生機(jī)制和癌癥治療的研究。下列說法正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/28 10:30:1組卷:5引用:2難度:0.7
  • 2.科學(xué)家對(duì)乳酸脫氫酶(LDH)進(jìn)行了改造,使其能夠高效地生產(chǎn)高純度的苯乳酸?;卮鹣铝杏嘘P(guān)問題:
    (1科學(xué)家改造乳酸脫氫酶時(shí)需要做的第一步是
     
    。研究發(fā)現(xiàn),要將LDH基因改造成為mLDH(改造后的乳酸脫氫酶)基因,需將LDH第52位的酪氨酸替換為亮氨酸,使得活性中心增大,才能用于生產(chǎn)苯乳酸。
    ①先將LDH基因片段連人載體中,形成環(huán)狀質(zhì)粒(如圖1)。
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    將突變后的序列設(shè)計(jì)在引物1中,以環(huán)狀質(zhì)粒為PCR的
     
    ,再向體系中加入四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、
     
    ,以及堿基替換了的引物擴(kuò)增LDH基因,PCR產(chǎn)物的序列便引入了預(yù)期的突變。
    ②上述PCR產(chǎn)物為鏈狀DNA分子,改造后的LDH基因序列位于PCR產(chǎn)物的兩側(cè),需要用
     
    酶將產(chǎn)物兩端連接,獲得含有mLDH基因的質(zhì)粒。
    (2)產(chǎn)生苯乳酸的過程還需FDH酶參與?,F(xiàn)需要構(gòu)建同時(shí)含有mLDH、FDH的基因表達(dá)載體。請(qǐng)你根據(jù)圖2,提出將兩個(gè)基因依次連入載體的思路:
     
    (要體現(xiàn)選用的內(nèi)切酶和連接的先后順序)。
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    (3)上述科學(xué)實(shí)踐屬于生物工程中的
     
    工程。在生命科學(xué)高速發(fā)展的今天,基因改造已十分成熟,但有一些紅線不能觸碰,請(qǐng)你舉出一例我國(guó)明令禁止的生物工程應(yīng)用:
     
    。

    發(fā)布:2024/10/28 17:0:2組卷:9引用:2難度:0.6
  • 3.我國(guó)科學(xué)家將人類的生長(zhǎng)激素(GH)基因?qū)膈庺~的受精卵,培育出能快速生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)基因鯉魚。下列敘述錯(cuò)誤的是(  )

    發(fā)布:2024/10/28 17:0:2組卷:9引用:2難度:0.7
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