細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、代謝、遺傳等都與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)，而對(duì)蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用，首先需要獲得高純度的蛋白質(zhì)。從紅細(xì)胞中提取和分離血紅蛋白的流程圖如圖，回答下列問(wèn)題：

（1）血紅蛋白因含有

血紅素

血紅素

（該物質(zhì)中含F(xiàn)e²⁺）而呈紅色，這有利于對(duì)提取過(guò)程進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
（2）在進(jìn)行樣品處理時(shí)首先要使用

生理鹽水

生理鹽水

，對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌，目的是

去除雜蛋白（或血漿蛋白），以便于后續(xù)步驟的分離純化

去除雜蛋白（或血漿蛋白），以便于后續(xù)步驟的分離純化

。在該過(guò)程中，若

離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

，則會(huì)使白細(xì)胞一同沉淀，達(dá)不到分離的效果。
（3）流程圖中步驟A、B分別是

血紅蛋白的釋放和粗分離

血紅蛋白的釋放和粗分離

。
（4）用凝膠色譜法純化蛋白質(zhì)時(shí)，分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)

先

先

（“先”或“后”）從層析柱中洗脫出來(lái)，裝填凝膠柱時(shí)，色譜柱不能有氣泡存在，原因是

氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果

氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果

。
（5）若要判斷提取分離的血紅蛋白是否達(dá)到要求，需要進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行鑒定，其中的SDS的作用是

SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過(guò)了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移速率完全取決于分子的大小

SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過(guò)了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移速率完全取決于分子的大小

。