人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥，但是心梗患者注射大劑量的t-PA會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血。研究證實(shí)，將t-PA蛋白第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血副作用。據(jù)此，先對(duì)天然的t-PA基因進(jìn)行序列改造，然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達(dá)該改造后的基因，可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。（注：如圖表示相關(guān)的目的基因載體及限制酶，PCLY11為質(zhì)粒，新霉素為抗生素）。請(qǐng)回答下列問題：
（1）以上制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過程被稱為 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)工程。已知t-PA基因序列已測(cè)出，且第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA，而絲氨酸的模板鏈堿基序列為AGA，因此要獲得改造后的目的基因最好采用 化學(xué)合成化學(xué)合成法獲得。若t-PA基因可從cDNA文庫中獲取，cDNA文庫中的基因 不含不含（填“含有”或“不含”）內(nèi)含子序列。
（2）若用PCR技術(shù)擴(kuò)增改良后的t-PA基因，需要在PCR擴(kuò)增儀中加入 22種引物，其作用是 使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。在t-PA改良基因與質(zhì)粒pCLY11構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要用限制酶 BglⅡ和XmaⅠBglⅡ和XmaⅠ切割。
（3）以大腸桿菌作為受體細(xì)胞，在含新霉素的培養(yǎng)基中形成菌落的受體細(xì)胞并非都是目的菌株，原因是 導(dǎo)入未連目的基因的質(zhì)粒的大腸桿菌也能在這種培養(yǎng)基上生長導(dǎo)入未連目的基因的質(zhì)粒的大腸桿菌也能在這種培養(yǎng)基上生長，這時(shí)需選擇呈 白白色的菌落，進(jìn)一步培養(yǎng)檢測(cè)和鑒定，以選育出能生產(chǎn)改良t-PA蛋白的工程菌株。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】蛋白質(zhì)；化學(xué)合成；不含；2；使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；BglⅡ和XmaⅠ；導(dǎo)入未連目的基因的質(zhì)粒的大腸桿菌也能在這種培養(yǎng)基上生長；白
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：36引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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