蜘蛛絲是自然界中機(jī)械性能最好的天然蛋白纖維，其強(qiáng)度高于制作防彈衣的凱夫拉纖維，有廣泛的應(yīng)用前景。但如何大量獲取蜘蛛絲的問(wèn)題一直難以解決。2018年8月，中科院分子植物科學(xué)卓越創(chuàng)新中心利用基因工程技術(shù)成功在家蠶絲腺和蠶繭中大量表達(dá)蜘蛛絲蛋白?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)（如圖所示），需要在目的基因前后兩端分別引入 XbaⅠ和SacⅠXbaⅠ和SacⅠ的酶切位點(diǎn)，該方法比用同一種酶進(jìn)行酶切的優(yōu)勢(shì)是 防止目的基因自身環(huán)化，防止目的基因反向連接防止目的基因自身環(huán)化，防止目的基因反向連接（答出一點(diǎn)即可）。
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增蜘蛛絲基因前，需根據(jù)目的基因的核苷酸序列設(shè)計(jì) 22種引物，進(jìn)行PCR時(shí)需加熱至90～95℃然后冷卻至55～60℃，此操作的目的是 使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上。
（3）為能從蠶絲中提取蛛絲蛋白，基因表達(dá)載體中目的基因的首段必須含有使其僅能在蠶的絲腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的 啟動(dòng)子啟動(dòng)子。當(dāng)其與 RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合，才能驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程，最終翻譯成功。
（4）在研究過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)目的基因已經(jīng)插入到蠶絲腺細(xì)胞染色體的DNA上，蠶絲中卻未能提取到蜘蛛絲，請(qǐng)分析原因及檢測(cè)方法 蛛絲蛋白基因未能正常進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)檢測(cè)，蛛絲蛋白未能進(jìn)行正常翻譯，可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)蛛絲蛋白基因未能正常進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)檢測(cè)，蛛絲蛋白未能進(jìn)行正常翻譯，可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)。
（5）研究人員發(fā)現(xiàn)若將蛛絲蛋白31號(hào)位的色氨酸替換為酪氨酸，蛛絲韌性可提高50%，此成果所用到的工程技術(shù)為 蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】XbaⅠ和SacⅠ；防止目的基因自身環(huán)化，防止目的基因反向連接；2；使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上；啟動(dòng)子；RNA聚合酶；蛛絲蛋白基因未能正常進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)檢測(cè)，蛛絲蛋白未能進(jìn)行正常翻譯，可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)；蛋白質(zhì)工程
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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