病菌感染首蓓，對(duì)首蓓的產(chǎn)量和品質(zhì)有很多的影響，研究人員將溶菌酶基因（LYZ基因）和綠色熒光蛋白基因（GFP基因）連接為L(zhǎng)YZ一GFP基因，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入到苜蓿中。本實(shí)驗(yàn)中使用圖1所示質(zhì)粒構(gòu)建載體，Vir區(qū)的基因產(chǎn)物是T一DNA整合到植物基因組中的必備條件，圖2表示含有LYZ一GFP基因的DNA片段。圖中箭頭表示相應(yīng)限制酶的酶切位點(diǎn)，酶級(jí)形成的末端均為私性末端，據(jù)圖回答問(wèn)題：
（1）用PCR法對(duì)圖2所示基因片段進(jìn)行擴(kuò)增，并將產(chǎn)物用限制酶Ⅰ進(jìn)行切割，質(zhì)粒用同樣的限制酶切割，用DNA連接酶進(jìn)行連接。只考慮兩段不同DNA片段相連（不考慮自身的連接）的情況所得到的環(huán)狀DNA分子有 22種。
（2）本實(shí)驗(yàn)中的目的基因是 溶菌酶基因（或LYZ基因）溶菌酶基因（或LYZ基因），最佳的限制酶的選擇是 限制酶I、限制酶Ⅲ限制酶I、限制酶Ⅲ。在鑒別首蓓細(xì)胞中是否含有目的基因的時(shí)候，研究者可選擇的標(biāo)記基因有 卡那霉素抗性基因和綠色熒光蛋卡那霉素抗性基因和綠色熒光蛋。
（3）目的基因在體外擴(kuò)增時(shí)，與體內(nèi)復(fù)制的區(qū)別在于 體外擴(kuò)增過(guò)程不霱要解旋酶體外擴(kuò)增過(guò)程不霱要解旋酶。
（4）目的基因的表達(dá)產(chǎn)物在植物體中發(fā)揮作用時(shí) 不具有不具有（填“具有”或“不具有”）特異性。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】2；溶菌酶基因（或LYZ基因）；限制酶I、限制酶Ⅲ；卡那霉素抗性基因和綠色熒光蛋；體外擴(kuò)增過(guò)程不霱要解旋酶；不具有
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：4引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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