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新冠肺炎的病原體是一種新型冠狀病毒,其遺傳物質(zhì)極易降解,患者會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、嘔吐、呼吸困難等一系列消化和呼吸系統(tǒng)癥狀。為快速確定治療方案,需對疑似患者進(jìn)行病毒核酸檢測,常用方法之一為RT-PCR熒光探針法,過程如圖所示,請回答下列問題:

(1)為得到檢測所需的大量病毒核酸基因,科研人員利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。如果PCR反應(yīng)得不到相應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物,可判斷待測樣品中不含病毒核酸片段,PCR技術(shù)還可用于基因工程中的哪一步?
獲取目的基因
獲取目的基因

(2)用RT-PCR熒光探針法檢測病毒核酸時(shí),樣本核酸通過過程①
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
得到cDNA,過程②中用到的酶是
耐高溫的DNA聚合酶/TaqDNA聚合酶
耐高溫的DNA聚合酶/TaqDNA聚合酶
,此外反應(yīng)體系中還應(yīng)加入
一段帶有熒光物質(zhì)和淬滅物質(zhì)的特異性單鏈核苷酸序列
一段帶有熒光物質(zhì)和淬滅物質(zhì)的特異性單鏈核苷酸序列
作為探針。
(3)已知當(dāng)探針完整時(shí),淬滅物質(zhì)抵消了熒光物質(zhì)的熒光發(fā)射,檢測不到熒光信號,請嘗試解釋熒光探針法檢測新型冠狀病毒的原理
探針為一段帶有熒光物質(zhì)和淬滅物質(zhì)的特異性單鏈核苷酸序列,在探針完整的情況下,熒光物質(zhì)發(fā)射的熒光信號被淬滅物質(zhì)吸收,反應(yīng)體系中檢測不到熒光強(qiáng)度。如PCR反應(yīng)體系中存在目的基因(即病毒核酸序列),該探針與模板鏈結(jié)合,TaqDNA聚合酶催化子鏈延伸時(shí)能夠該熒光探針降解,熒光物質(zhì)與淬滅物質(zhì)分離,游離的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光。因此可以通過檢測反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度,來判斷PCR產(chǎn)物(新冠病毒核酸)擴(kuò)增量。
探針為一段帶有熒光物質(zhì)和淬滅物質(zhì)的特異性單鏈核苷酸序列,在探針完整的情況下,熒光物質(zhì)發(fā)射的熒光信號被淬滅物質(zhì)吸收,反應(yīng)體系中檢測不到熒光強(qiáng)度。如PCR反應(yīng)體系中存在目的基因(即病毒核酸序列),該探針與模板鏈結(jié)合,TaqDNA聚合酶催化子鏈延伸時(shí)能夠該熒光探針降解,熒光物質(zhì)與淬滅物質(zhì)分離,游離的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光。因此可以通過檢測反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度,來判斷PCR產(chǎn)物(新冠病毒核酸)擴(kuò)增量。

【答案】獲取目的基因;逆轉(zhuǎn)錄;耐高溫的DNA聚合酶/TaqDNA聚合酶;一段帶有熒光物質(zhì)和淬滅物質(zhì)的特異性單鏈核苷酸序列;探針為一段帶有熒光物質(zhì)和淬滅物質(zhì)的特異性單鏈核苷酸序列,在探針完整的情況下,熒光物質(zhì)發(fā)射的熒光信號被淬滅物質(zhì)吸收,反應(yīng)體系中檢測不到熒光強(qiáng)度。如PCR反應(yīng)體系中存在目的基因(即病毒核酸序列),該探針與模板鏈結(jié)合,TaqDNA聚合酶催化子鏈延伸時(shí)能夠該熒光探針降解,熒光物質(zhì)與淬滅物質(zhì)分離,游離的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光。因此可以通過檢測反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度,來判斷PCR產(chǎn)物(新冠病毒核酸)擴(kuò)增量。
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/5/23 8:0:8組卷:6引用:2難度:0.7
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  • 2.科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題:
    (1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
     
    (填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”)。可利用定點(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體,常用
     
    將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞,還需用到植物細(xì)胞工程中的
     
    技術(shù),才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
    (2)PCR過程所依據(jù)的原理是
     
    。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增,若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次,則需要在緩沖液中至少加入
     
    個(gè)引物。
    (3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為
     
    ??蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大,可能的原因是
     
    。
    (4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
     
    。
    A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
    B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
    C.人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
    D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克隆),可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代

    發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6
  • 3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是(  )

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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