如圖1是基因工程操作時用到的質(zhì)粒,其中不同數(shù)字代表不同的限制酶切點,回答下列問題:
(1)基因工程的核心操作是 構(gòu)建基因表達(dá)載體構(gòu)建基因表達(dá)載體。在此核心操作過程中應(yīng)選用 1和31和3(填圖中數(shù)字)兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,選用兩種酶而不選擇一種酶進(jìn)行切割的目的是 避免目的基因自身環(huán)化和反向連接避免目的基因自身環(huán)化和反向連接。除圖示外,該質(zhì)粒若作為載體還必須具有的結(jié)構(gòu)是 復(fù)制原點復(fù)制原點。
(2)若目的基因兩側(cè)沒有上述限制酶切點,可用圖所示的 11方法在目的基因兩側(cè)添加限制酶識別序列,推測在PCR的第 22次循環(huán)后可得到添加了一側(cè)限制酶識別序列的目的基因片段,在PCR的第次循環(huán)后可得到添加了兩側(cè)限制酶識別序列的目的基因片段。
(3)請寫出限制酶專一性的兩點體現(xiàn) 只能識別特定的核苷酸序列,在特定的切點切割DNA分子只能識別特定的核苷酸序列,在特定的切點切割DNA分子。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】構(gòu)建基因表達(dá)載體;1和3;避免目的基因自身環(huán)化和反向連接;復(fù)制原點;1;2;只能識別特定的核苷酸序列,在特定的切點切割DNA分子
【解答】
【點評】
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