家禽的飼料中富含谷物,纖維素是谷物的重要成分,但家禽消化道中缺少能降解纖維素的酶,阻礙了家禽對飼料的吸收與利用。研究人員利用轉基因技術改造乳酸桿菌,將其添加到飼料中,以提高家禽養(yǎng)殖效率??莶菅挎邨U菌能分泌一種可降解纖維素的酶,這種酶由W基因編碼。為在乳酸桿菌中表達W基因,需使用圖1中質粒作為載體,圖2為含W基因的DNA片段?;卮鹣铝袉栴}:
(1)在將重組質粒導入乳酸桿菌之前,需要用 Ca2+Ca2+處理乳酸桿菌,使之處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。乳酸桿菌作為基因工程的受體細胞的優(yōu)點有 繁殖快、是單細胞結構、自身遺傳物質相對較少繁殖快、是單細胞結構、自身遺傳物質相對較少(答出3點)。
(2)用PCR技術擴增W基因利用了 DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制的原理,用到的引物的作用是 與DNA單鏈結合,使DNA聚合酶從引物的一端延伸子鏈與DNA單鏈結合,使DNA聚合酶從引物的一端延伸子鏈,用到的DNA聚合酶與普通的酶相比,具有的特點是 耐高溫耐高溫。
(3)W基因以乙鏈為轉錄模板鏈,轉錄時mRNA自身延伸的方向為5'→3'。下表是幾種限制酶的識別序列及切割位點,圖1、圖2標注了相關限制酶的酶切位點。為獲得能正確表達W基因的重組質粒,應分別使用哪些限制酶對質粒和含W基因的DNA片段進行切割 質粒:限制酶HindⅢ、MfeⅠ;含W基因的DNA片段:限制酶HindⅢ、EcoRⅠ質粒:限制酶HindⅢ、MfeⅠ;含W基因的DNA片段:限制酶HindⅢ、EcoRⅠ?
限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ | KpnⅠ | MfeⅠ | HindⅢ |
識別位點 | ↓5'-GAATTC-3'3'-CTTAAG-5'↑ | ↓5'-GGATCC-3'3'-CCTAGG-5'↑ | ↓5'-GGTACC-3'3'-CCATGG-5'↑ | ↓5'-CAATTG-3'3'-GTTAAC-5'↑ | ↓5'-AAGCTT-3'3'-TTCGAA-5'↑ |
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】Ca2+;繁殖快、是單細胞結構、自身遺傳物質相對較少;DNA雙鏈復制;與DNA單鏈結合,使DNA聚合酶從引物的一端延伸子鏈;耐高溫;質粒:限制酶HindⅢ、MfeⅠ;含W基因的DNA片段:限制酶HindⅢ、EcoRⅠ
【解答】
【點評】
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