反義基因技術(shù)是根據(jù)核酸雜交原理設(shè)計(jì)針對(duì)特定靶序列的反義核酸，從而抑制特定基因的表達(dá)的技術(shù)。為找到治療高血壓的新醫(yī)療手段，科學(xué)家構(gòu)建了包含反義ACE基因（血管緊張素基因）的表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入小鼠體內(nèi)，實(shí)驗(yàn)取得了較好的效果?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，所用的工具酶是限制酶和

DNA連接酶

DNA連接酶

，后一種酶催化

磷酸二酯鍵

磷酸二酯鍵

鍵的形成。限制酶的作用特點(diǎn)是

能識(shí)別DNA分子中特定的脫氧核苷酸序列，并在該位置將DNA進(jìn)行剪切

能識(shí)別DNA分子中特定的脫氧核苷酸序列，并在該位置將DNA進(jìn)行剪切

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（2）不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，而必須要通過(guò)載體，原因是

保證目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在和高效的表達(dá)

保證目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在和高效的表達(dá)

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（3）科學(xué)家在構(gòu)建包含反義ACE基因表達(dá)載體時(shí)，需要將ACE基因反向連接到特異性的啟動(dòng)子和

終止子

終止子

之間，使得反義基因能夠在受體細(xì)胞中表達(dá)。試分析其降壓作用的原理：

反義基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA與血管緊張素基因ACE轉(zhuǎn)錄的mRNA能夠發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)從而阻止了血管緊張素的合成，進(jìn)而起到降血壓的作用

反義基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA與血管緊張素基因ACE轉(zhuǎn)錄的mRNA能夠發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)從而阻止了血管緊張素的合成，進(jìn)而起到降血壓的作用

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（4）基因工程操作時(shí)，首先需要獲得大量的目的基因，實(shí)驗(yàn)室里常利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是指

根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)

根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)

。PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、

延伸

延伸

三步，其中復(fù)性的結(jié)是

引物與模板鏈之間互補(bǔ)配對(duì) 形成 氫鍵的過(guò)程，為后續(xù)子鏈延伸做準(zhǔn)備

引物與模板鏈之間互補(bǔ)配對(duì) 形成 氫鍵的過(guò)程，為后續(xù)子鏈延伸做準(zhǔn)備

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