2020年12月中央經濟工作會議指出：種子是農業(yè)的“芯片”，要開展種源“卡脖子”技術攻關。如圖為某科研團隊培育“華恢1號”抗蟲水稻的主要操作流程，據(jù)圖回答：
（1）過程①表示 基因表達載體的構建基因表達載體的構建，該過程中需要使用到的工具酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。
（2）在基因工程中獲取目的基因的方法除圖中方法外，還有利用PCR技術擴增和 從基因文庫中獲取從基因文庫中獲取。檢測目的基因是否導入受體細胞可用DNA分子雜交技術，要用 放射性同位素標記的含目的基因的DNA片段放射性同位素標記的含目的基因的DNA片段作探針。
（3）組建理想的載體需要對天然的質粒進行改造。如圖是天然土壤農桿菌Ti質粒的結構示意圖（標示了部分基因及部分限制酶作用位點），據(jù)圖分析：
①人工改造質粒時、用限制酶Ⅰ處理，其目的是：第一，去除質粒上的tms和tmr基因，保證T-DNA進入水稻細胞后不會促進細胞的分裂和生長；第二，使質粒帶有單一限制酶作用位點使質粒帶有單一限制酶作用位點，有利于目的基因（或外源DNA）準確插入；第三，使質粒大小合適，可以提高轉化效率等。
②若用限制酶Ⅱ切割經過①過程改造的理想質粒和帶有殺蟲基因的DNA分子，并構成重組Ti質粒。分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導入殺蟲基因的水稻胚細胞，觀察到細胞的生長情況是 在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長。
（4）在大田里栽培轉基因植物時，要求轉基因植物與傳統(tǒng)作物之間間隔足夠遠的距離，以免 目的基因隨花粉傳播到傳統(tǒng)植物中，造成基因污染目的基因隨花粉傳播到傳統(tǒng)植物中，造成基因污染。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因表達載體的構建；限制酶和DNA連接酶；從基因文庫中獲??；放射性同位素標記的含目的基因的DNA片段；使質粒帶有單一限制酶作用位點；在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長；目的基因隨花粉傳播到傳統(tǒng)植物中，造成基因污染
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：2引用：1難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6