白細(xì)胞介素是一類淋巴因子．研究人員將人的白細(xì)胞介素的基因?qū)氲浇湍讣?xì)胞中，使其分泌出有活性的人白細(xì)胞介素．

（1）在體液免疫過(guò)程中，白細(xì)胞介素是由

T

T

細(xì)胞分泌的，可作用于受到抗原刺激的B細(xì)胞，使B細(xì)胞增殖，分化、形成

漿細(xì)胞和記憶

漿細(xì)胞和記憶

細(xì)胞．
（2）目的基因獲取：從健康人體外周靜脈血分離得到淋巴細(xì)胞，于37°培養(yǎng)48h,提取細(xì)胞總RNA，生成eDNA．根據(jù)已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通過(guò)PCR擴(kuò)增獲取目的基因，此時(shí)需要加入的反應(yīng)物與生成cDNA時(shí)所加反應(yīng)物不同的是

模板cDNA、耐高溫（熱穩(wěn)定）DNA聚合酶（Taq酶）、引物

模板cDNA、耐高溫（熱穩(wěn)定）DNA聚合酶（Taq酶）、引物

．
（3）重組載體的構(gòu)建：用兩種限制酶EcoR1與EcoR52處理載體和目的基因后，用

DNA連接

DNA連接

酶處理，形成重組載體．該載體與細(xì)胞膜上載體的化學(xué)本質(zhì)分別是

DNA

DNA

和

蛋白質(zhì)

蛋白質(zhì)

．
（4）將重組載體導(dǎo)入酵母細(xì)胞，在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間后，收集菌液離心取

上清液

上清液

（上清液/菌體）進(jìn)行產(chǎn)物鑒定．若要統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)液中酵母菌的活菌數(shù)目，常用的方法是

稀釋涂布平板法

稀釋涂布平板法

．
（5）利用純化的產(chǎn)物進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，可研究人白細(xì)胞介素對(duì)于

促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖（抑制腫瘤細(xì)胞增殖）

促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖（抑制腫瘤細(xì)胞增殖）

的作用．