葉綠體基因工程是以葉綠體為載體，操作流程類似細(xì)胞核基因工程。研究發(fā)現(xiàn)在葉綠體中表達(dá)外源基因比在細(xì)胞核中表達(dá)具有高效性、安全性等優(yōu)勢。某科研團(tuán)隊(duì)將胰島素基因分別整合到番茄葉綠體DNA和細(xì)胞核DNA中，研究其表達(dá)效果。
（1）葉綠體基因工程的核心是構(gòu)建基因表達(dá)載體，基因表達(dá)載體中除目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、

終止子

終止子

、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等。啟動(dòng)子的功能是

RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

。
（2）將胰島素基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄細(xì)胞葉綠體時(shí)，通常采用

基因槍法

基因槍法

方法幫助其穿過多層生物膜，即將包裹在金屬顆粒表面的基因表達(dá)載體轟擊進(jìn)入葉綠體，提高轉(zhuǎn)化效率。
（3）檢測胰島素基因是否成功導(dǎo)入番茄細(xì)胞的葉綠體DNA時(shí)，首先提取相關(guān)生物DNA，用胰島素基因的特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然后再用標(biāo)記的胰島素基因探針檢測，實(shí)驗(yàn)處理如下表。

項(xiàng)目 組別	提取的DNA	檢測結(jié)果
實(shí)驗(yàn)組	①	②
陽性對照組	胰島素基因片段	③
陰性對照組	④	不出現(xiàn)雜交帶

上表中①是

轉(zhuǎn)基因番茄中提取的葉綠體DNA

轉(zhuǎn)基因番茄中提取的葉綠體DNA

，④是

非轉(zhuǎn)基因番茄中提取的葉綠體DNA

非轉(zhuǎn)基因番茄中提取的葉綠體DNA

。若

②與③均出現(xiàn)雜交帶

②與③均出現(xiàn)雜交帶

，則說明胰島素基因成功導(dǎo)入番茄細(xì)胞的葉綠體DNA。
（4）有研究表明：胰島素基因在番茄葉綠體DNA上表達(dá)比在細(xì)胞核DNA上表達(dá)更為高效，請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證這一結(jié)論。簡要寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路和預(yù)期結(jié)果

將番茄均分為甲、乙兩組，分別將胰島素基因表達(dá)載體導(dǎo)入甲組番茄細(xì)胞核和乙組番茄葉綠體，一段時(shí)間后檢測并比較兩組番茄的胰島素含量。預(yù)期結(jié)果：乙組胰島素含量高于甲組

將番茄均分為甲、乙兩組，分別將胰島素基因表達(dá)載體導(dǎo)入甲組番茄細(xì)胞核和乙組番茄葉綠體，一段時(shí)間后檢測并比較兩組番茄的胰島素含量。預(yù)期結(jié)果：乙組胰島素含量高于甲組

。