血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分,負責(zé)血液中O2和部分CO2的運輸。根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖(如圖),請回答下列問題:
(1)凝膠色譜法中所用的凝膠大多數(shù)是由葡聚糖或瓊脂糖葡聚糖或瓊脂糖等多糖類化合物構(gòu)成的微小多孔球體。
(2)將實驗流程補充完整:A為血紅蛋白的釋放血紅蛋白的釋放,B為凝膠色譜柱的裝填凝膠色譜柱的裝填。
(3)洗滌紅細胞次數(shù)過少會影響分離效果的原因是無法除去血漿蛋白無法除去血漿蛋白。
(4)在裝填色譜柱時不能有氣泡存在,因為氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果;如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動紅色區(qū)帶均勻一致地移動,說明色譜柱制作成功。
(5)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中,SDS能與各種蛋白質(zhì)結(jié)合形成蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物,由于SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別,從而使電泳的遷移率完全取決于分子的大小分子的大小。
【答案】葡聚糖或瓊脂糖;血紅蛋白的釋放;凝膠色譜柱的裝填;無法除去血漿蛋白;氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序;紅色區(qū)帶均勻一致地移動;分子的大小
【解答】
【點評】
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