當(dāng)前位置： 2023-2024學(xué)年江蘇省南京師大附中高三（上）質(zhì)檢生物試卷> 試題詳情

研究表明，服用α-干擾素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。人參是一種名貴藥材，具有較好的滋補作用。限制酶的發(fā)現(xiàn)為DNA的切割和功能基因的獲得創(chuàng)造了條件。限制酶Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ的識別序列及切割位點分別為↓GATC、G↓AATTC、C↓GATCC。含干擾素基因的DNA片段如圖1所示，圖2為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程圖，①～④表示相關(guān)的操作。請回答下列問題：

（1）結(jié)合上圖，在構(gòu)建基因表達載體時，為克服目的基因和農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒的任意連接等，應(yīng)選擇用限制酶
EcoRⅠ和BamHⅠ
EcoRⅠ和BamHⅠ
處理含某目的基因的DNA和質(zhì)粒。
（2）DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
。
（3）圖2操作①常利用PCR技術(shù)獲取和擴增干擾素基因，除含有干擾素基因的DNA片段之外，該過程需要提供
4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶（dNTP和Taq酶）
4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶（dNTP和Taq酶）
以及與干擾素基因兩端兩條模板鏈結(jié)合的兩種引物。設(shè)計引物時，為了保證目的基因與質(zhì)粒順利連接，防止出現(xiàn)自身環(huán)化連接，需要在兩種引物的一端分別加上EcoRⅠ和BamHⅠ的識別序列
GAATTC和CGATCC
GAATTC和CGATCC
。
（4）圖2步驟②除EcoRⅠ、BamHⅠ兩種酶外，還需要用
DNA連接
DNA連接
酶。構(gòu)建的基因表達載體除含有目的基因片段以外，還必須有
啟動子和終止子
啟動子和終止子
，以保證干擾素基因能在人參愈傷組織細(xì)胞中穩(wěn)定存在和表達。同時，還應(yīng)含有標(biāo)記基因以便于
篩選含有重組DNA分子的受體細(xì)胞
篩選含有重組DNA分子的受體細(xì)胞
。
（5）圖2操作④常用
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
技術(shù)檢測干擾素基因是否成功表達出干擾素。

【考點】基因工程的操作過程綜合．

【答案】EcoRⅠ和BamHⅠ；磷酸二酯鍵；4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶（dNTP和Taq酶）；GAATTC和CGATCC；DNA連接；啟動子和終止子；篩選含有重組DNA分子的受體細(xì)胞；抗原—抗體雜交

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/8/6 8:0:9組卷：28引用：3難度：0.5

相似題

1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（　?。?/h2>

A．可以將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞

B．實驗過程中采用顯微注射的方法導(dǎo)入目的基因

C．檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄的方法是抗原-抗體雜交

D．目的基因只存在于動物的乳腺細(xì)胞中

發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：5引用：1難度：0.9

解析

2．最近，科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中．這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進展．
（1）將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞，常用的方法是

．所使用到儀器是

．
（2）在基因工程中，將目的基因與運載體結(jié)合時，必須用

酶和

酶．常用的運載體有

、

、

等，而作為運載體必須具備相應(yīng)的條件，例如應(yīng)具有

以便進行篩選．進行基因轉(zhuǎn)移時，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的

中，原因是

．
（3）通常采用

技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中．
（4）在研究膀胱生物反應(yīng)器時，應(yīng)使外源基因在小鼠的

細(xì)胞中特異性表達．
（5）如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中，從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于

．
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：3引用：1難度：0.3
解析
3．抗凝血酶是一種天然抗凝血劑，在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達出了人的抗凝血酶，如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段，回答下列問題：

（1）現(xiàn)有以下4種引物，引物A15'-GGACCCCGGG-3'；引物B：5'-CATTTCTAGA-3'；引物C：5'-CCTGGGGCCC-3'；引物D：5'-GTAAAGATCT-3'；，利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因，應(yīng)選用引物

（填引物名稱），擴增產(chǎn)物可選擇限制酶

切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
（2）所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子，其作用是

，將構(gòu)建的基因表達載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上，長出了多個大腸桿菌菌落，這些菌落并非都是目的菌株，原因是

。
（3）將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒，再通過

方法導(dǎo)入到豬或羊的

細(xì)胞內(nèi)，通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：4引用：1難度：0.6
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1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（ ?。?/h2>

1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（　?。?/h2>