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2023-2024學(xué)年江蘇省南京師大附中高三(上)質(zhì)檢生物試卷
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試題詳情
研究表明,服用α-干擾素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。人參是一種名貴藥材,具有較好的滋補作用。限制酶的發(fā)現(xiàn)為DNA的切割和功能基因的獲得創(chuàng)造了條件。限制酶Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ的識別序列及切割位點分別為↓GATC、G↓AATTC、C↓GATCC。含干擾素基因的DNA片段如圖1所示,圖2為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程圖,①~④表示相關(guān)的操作。請回答下列問題:
(1)結(jié)合上圖,在構(gòu)建基因表達載體時,為克服目的基因和農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒的任意連接等,應(yīng)選擇用限制酶
EcoRⅠ和BamHⅠ
EcoRⅠ和BamHⅠ
處理含某目的基因的DNA和質(zhì)粒。
(2)DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
。
(3)圖2操作①常利用PCR技術(shù)獲取和擴增干擾素基因,除含有干擾素基因的DNA片段之外,該過程需要提供
4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶(dNTP和Taq酶)
4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶(dNTP和Taq酶)
以及與干擾素基因兩端兩條模板鏈結(jié)合的兩種引物。設(shè)計引物時,為了保證目的基因與質(zhì)粒順利連接,防止出現(xiàn)自身環(huán)化連接,需要在兩種引物的一端分別加上EcoRⅠ和BamHⅠ的識別序列
GAATTC和CGATCC
GAATTC和CGATCC
。
(4)圖2步驟②除EcoRⅠ、BamHⅠ兩種酶外,還需要用
DNA連接
DNA連接
酶。構(gòu)建的基因表達載體除含有目的基因片段以外,還必須有
啟動子和終止子
啟動子和終止子
,以保證干擾素基因能在人參愈傷組織細(xì)胞中穩(wěn)定存在和表達。同時,還應(yīng)含有標(biāo)記基因以便于
篩選含有重組DNA分子的受體細(xì)胞
篩選含有重組DNA分子的受體細(xì)胞
。
(5)圖2操作④常用
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
技術(shù)檢測干擾素基因是否成功表達出干擾素。
【考點】
基因工程的操作過程綜合
.
【答案】
EcoRⅠ和BamHⅠ;磷酸二酯鍵;4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶(dNTP和Taq酶);GAATTC和CGATCC;DNA連接;啟動子和終止子;篩選含有重組DNA分子的受體細(xì)胞;抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/8/6 8:0:9
組卷:28
引用:3
難度:0.5
相似題
1.
目前,科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物.下列與之相關(guān)的說法,正確的是( ?。?/h2>
A.可以將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞
B.實驗過程中采用顯微注射的方法導(dǎo)入目的基因
C.檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄的方法是抗原-抗體雜交
D.目的基因只存在于動物的乳腺細(xì)胞中
發(fā)布:2024/10/26 17:0:2
組卷:5
引用:1
難度:0.9
解析
2.
最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進展.
(1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞,常用的方法是
.所使用到儀器是
.
(2)在基因工程中,將目的基因與運載體結(jié)合時,必須用
酶和
酶.常用的運載體有
、
、
等,而作為運載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
以便進行篩選.進行基因轉(zhuǎn)移時,通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
中,原因是
.
(3)通常采用
技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
(4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
細(xì)胞中特異性表達.
(5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
.
發(fā)布:2024/10/26 17:0:2
組卷:3
引用:1
難度:0.3
解析
3.
抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
(1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
(填引物名稱),擴增產(chǎn)物可選擇限制酶
切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
(2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子,其作用是
,將構(gòu)建的基因表達載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
。
(3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過
方法導(dǎo)入到豬或羊的
細(xì)胞內(nèi),通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。
發(fā)布:2024/10/26 17:0:2
組卷:4
引用:1
難度:0.6
解析
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