目前針對(duì)新冠病毒的檢測(cè)方法主要有核酸檢測(cè)、抗原檢測(cè)、抗體檢測(cè)三大類(lèi)。目前常用“熒光RT-PCR技術(shù)”進(jìn)行核酸檢測(cè),方法是取被檢測(cè)者的mRNA在試劑盒中逆轉(zhuǎn)錄出cDNA,并大量擴(kuò)增,同時(shí)利用盒中熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來(lái)檢測(cè)PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA,在檢測(cè)過(guò)程中,隨著PCR的進(jìn)行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,“雜交雙鏈”熒光信號(hào)的強(qiáng)度也等比例增加,可通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖(如圖)。理論上,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性,但為了保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達(dá)到或超過(guò)閾值時(shí)才確診。
(1)如果要同時(shí)擴(kuò)增兩種基因,則試劑盒中的引物應(yīng)該有 44種,引物的作用是 使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。
(2)上圖中“平臺(tái)期”出現(xiàn)的最可能的原因是 試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加?,F(xiàn)有甲、乙兩個(gè)待檢樣本,檢測(cè)時(shí)都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線,但甲的a點(diǎn)比乙的a點(diǎn)明顯左移,這種結(jié)果出現(xiàn)的原因可能是甲樣本中的新冠病毒含量 更高更高。
(3)接種疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗制備時(shí)需將腺病毒的復(fù)制基因敲除后作為 運(yùn)載體運(yùn)載體,與新冠病毒相關(guān)基因構(gòu)建重組腺病毒。將腺病毒復(fù)制基因敲除的目的是 使病毒不能在人體細(xì)胞中復(fù)制,避免感染風(fēng)險(xiǎn)使病毒不能在人體細(xì)胞中復(fù)制,避免感染風(fēng)險(xiǎn)。
(4)單克隆抗體可用于治療新冠肺炎。制備單克隆抗體時(shí)需要將 B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞在體外大規(guī)模培養(yǎng),為防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害,應(yīng)采取的措施是 定期更換培養(yǎng)液定期更換培養(yǎng)液。
【答案】4;使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸;試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加;更高;運(yùn)載體;使病毒不能在人體細(xì)胞中復(fù)制,避免感染風(fēng)險(xiǎn);B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合;定期更換培養(yǎng)液
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:5引用:1難度:0.6
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1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
2.PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因,還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR,其操作步驟為:
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物,得到兩個(gè)常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物,突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物;
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增,得到突變目的基因序列?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān),DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
(2)在第一次PCR反應(yīng)中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過(guò)
(3)如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物,其步驟包括:發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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