酵母雙雜交技術是篩選能與已知蛋白互作的蛋白質的方法，其主要原理如圖1。黃瓜花葉病毒（CMV）可侵染200多種植物，病毒的外殼蛋白（CMVCP）直接參與病毒的細胞間轉移、癥狀表現(xiàn)等。研究人員利用酵母雙雜交技術，從CMV感染的番茄葉片cDNA文庫中篩選出CMVCP互作蛋白基因，圖2為構建CMVCP誘餌載體（能表達出BD-CP融合蛋白）的流程。請據(jù)圖回答下列問題。
（1）圖1中，獲得BD-X蛋白的關鍵是將相應序列連接形成融合基因，融合基因獲得過程屬于 基因突變基因突變（變異類型）。X與Y的結合能使轉錄因子的BD和AD同時結合到啟動子上，進而招募酶x催化LacZ基因的轉錄，酶X是 RNA聚合酶RNA聚合酶。
（2）圖2中，過程①提取總RNA時選擇有明顯感染癥狀葉片的原因是 癥狀明顯葉片細胞中含有大量CMV病毒，有豐富的CP基因癥狀明顯葉片細胞中含有大量CMV病毒，有豐富的CP基因。過程②中通常利用RT-PCR技術獲得cDNA，上述技術中不同循環(huán)次數(shù)的擴增產(chǎn)物電泳結果如圖3，則最適宜的循環(huán)次數(shù)是 1818次，依據(jù)是 2號條帶比1號條帶寬，而3號條帶較彌散（或2號條帶明亮、整齊）2號條帶比1號條帶寬，而3號條帶較彌散（或2號條帶明亮、整齊）。
（3）圖2過程③構建誘餌載體時，為保證CPcDNA能定向插入到指定位置，需要在過程②設計PCR引物時，在兩種引物的5'端分別添加BamH I和EcoR I識別序列在兩種引物的5'端分別添加BamH I和EcoR I識別序列。用獲得的誘餌載體先轉化大腸桿菌，再用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法將菌液接種到含 卡那霉素卡那霉素的選擇培養(yǎng)基上，挑取陽性單菌落細胞進行測序，確認插入的基因序列正確。
（4）獲得CMVCP誘餌載體轉化的酵母菌后，研究人員進一步開展CMVCP互作蛋白的篩選研究，其主要實驗流程是：構建感染CMV的番茄cDNA文庫→構建一系列靶蛋白載體→分別將靶蛋白載體導入誘餌載體轉化后酵母分別將靶蛋白載體導入誘餌載體轉化后酵母→接種培養(yǎng)，獲取呈 藍藍色的菌落細胞→篩選、鑒定互作蛋白。
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】基因突變；RNA聚合酶；癥狀明顯葉片細胞中含有大量CMV病毒，有豐富的CP基因；18；2號條帶比1號條帶寬，而3號條帶較彌散（或2號條帶明亮、整齊）；在兩種引物的5'端分別添加BamH I和EcoR I識別序列；稀釋涂布平板；卡那霉素；分別將靶蛋白載體導入誘餌載體轉化后酵母；藍
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：30引用：1難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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