重組PCR技術(shù)是一項新的PCR技術(shù)，通過重組PCR技術(shù)能將兩個不同的DNA連接成為一個新DNA分子。某科研小組從豬源大腸桿菌中擴增得到LTB和ST1兩個基因片段，利用重組PCR技術(shù)構(gòu)建了LTB-ST1融合基因，制備過程如圖所示。回答下列問題：
（1）利用PCR技術(shù)擴增目的基因的過程中，向反應(yīng)體系中加入的物質(zhì)除了引物和模板鏈外，還需要加入 耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸（或Taq酶和dNTP）耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸（或Taq酶和dNTP）。利用PCR技術(shù)擴增目的基因，依據(jù)的生物學(xué)原理是 DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制。
（2）從P2，P3兩種引物的角度分析，LTB和ST1基因能夠融合的關(guān)鍵是 這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對，PCR1和PCR2不能在同一個反應(yīng)體系中進行，原因是 P2和P3能結(jié)合，會干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過程P2和P3能結(jié)合，會干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過程。
（3）②過程 不需要不需要（填“需要”或“不需要”）加入引物，原因是 兩條母鏈可作為合成子鏈的引物兩條母鏈可作為合成子鏈的引物。
（4）科研小組為了檢測是否成功構(gòu)建出融合基因，將反應(yīng)后體系中的各種DNA分子進行電泳，結(jié)果如圖所示。則融合基因最可能是 33。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸（或Taq酶和dNTP）；DNA雙鏈復(fù)制；這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對；P2和P3能結(jié)合，會干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過程；不需要；兩條母鏈可作為合成子鏈的引物；3
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/2 8:0:9組卷：16引用：1難度：0.4
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1．以下是有關(guān)分離與鑒別DNA的技術(shù)，其中說法正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 16:30:6組卷：5引用：1難度：0.5 -
2．科研人員克隆了豬白細胞抗原基因（SLA-2基因），構(gòu)建了該基因的真核表達載體，進行了豬腎上皮細胞表達研究。實驗的主要流程如圖1，SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點后的數(shù)字表示距復(fù)制原點的距離。請回答：
（1）過程①中，PCR擴增SLA-2的原理是限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC ，下列4種引物中應(yīng)選擇的是。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是，該過程需要用處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細胞。然后將大腸桿菌涂布在含有（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳，請在答題紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
（4）科研中常用呤霉素對真核細胞進行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個濃度作為篩選濃度的原因是：既可以讓大部分沒有抗性的細胞死亡又不會讓。實驗結(jié)果如圖2，根據(jù)實驗結(jié)果最佳的嘌霉素篩選濃度為。
（5）過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細胞生產(chǎn)的抗原肽，其原理是，單克隆抗體能檢測其是否具有正確的，從而是否具有生物活性。
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：41引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”的實驗，說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：3引用：1難度：0.6
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