尖孢鐮刀菌會(huì)引起黃瓜枯萎病的發(fā)生。研究人員擬從土壤中分離篩選出對(duì)黃瓜枯萎病有抑制效果的拮抗細(xì)菌（jb9菌株），以期為黃瓜枯萎病提供生物防治。實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖1所示，回答下列問(wèn)題：
（1）將土壤樣品制成懸浮液，步驟I使用的接種方法是 平板劃線法平板劃線法，純化培養(yǎng)的關(guān)鍵是 無(wú)菌操作無(wú)菌操作。培養(yǎng)基a必備的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有 碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽。
（2）為驗(yàn)證jb9菌株的抑菌效果，需要先將尖孢鐮刀菌均勻地接種在培養(yǎng)基b表面，則接種方法是 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法。濾紙組作為對(duì)照組，用 無(wú)菌水無(wú)菌水處理濾紙。
（3）jb9菌株能合成分泌真菌細(xì)胞壁降解酶（HCD），抑制尖孢鐮刀菌（真菌）的生長(zhǎng)?？蒲腥藛T將獲取的HCD基因?qū)朦S瓜細(xì)胞，培育抗枯萎病的轉(zhuǎn)基因植株。含HCD基因的DNA片段、質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及限制酶切割位點(diǎn)如圖2所示。
①根據(jù)題意，將HCD基因與圖示的質(zhì)粒重組，應(yīng)選用的限制酶是 BamHI和HindⅢBamHI和HindⅢ。在篩選培養(yǎng)基上，要加入 氨芐青霉素氨芐青霉素來(lái)篩選含有HCD基因的受體細(xì)胞。將受體細(xì)胞培育后獲得轉(zhuǎn)基因植株。
②為確定轉(zhuǎn)HCD基因植株能抗枯萎病，在個(gè)體水平上的檢測(cè)方法是 用尖孢鐮刀菌感染轉(zhuǎn)HCD基因的植株，觀察其抗病情況用尖孢鐮刀菌感染轉(zhuǎn)HCD基因的植株，觀察其抗病情況。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】平板劃線法；無(wú)菌操作；碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽；稀釋涂布平板法；無(wú)菌水；BamHI和HindⅢ；氨芐青霉素；用尖孢鐮刀菌感染轉(zhuǎn)HCD基因的植株，觀察其抗病情況
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/7/5 8:0:9組卷：3引用：3難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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