PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理，進(jìn)行生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：

（1）PCR反應(yīng)的基本步驟是

變性、退火（復(fù)性）、延伸

變性、退火（復(fù)性）、延伸

。
（2）科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶只能催化

5'→3'

5'→3'

方向的聚合反應(yīng)，圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過(guò)程，有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段（稱(chēng)為岡崎片段），再形成較長(zhǎng)的分子，可推測(cè)參與以上過(guò)程的酶有

解旋酶、DNA聚合酶、DNA連接酶

解旋酶、DNA聚合酶、DNA連接酶

。在PCR過(guò)程中無(wú)岡崎片段形成的原因是

細(xì)胞內(nèi)是邊解旋邊復(fù)制，PCR復(fù)制過(guò)程是先完全解旋再?gòu)?fù)制

細(xì)胞內(nèi)是邊解旋邊復(fù)制，PCR復(fù)制過(guò)程是先完全解旋再?gòu)?fù)制

。
（3）雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止。某同學(xué)現(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段，通過(guò)PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端（3′為堿基C）不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段，將以上子鏈DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到

3

3

種不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外，還需要加入下列哪組原料：

B

B

。
A．dGTP、dATP、dTTP
B．dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C．dGTP、dATP、dTTP、dCTP
D．ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP
（4）如圖3為形成單鏈DNA后，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增示意圖。據(jù)圖分析回答：
催化①過(guò)程的酶是

逆轉(zhuǎn)錄酶

逆轉(zhuǎn)錄酶

；核酸酶H的作用是

切除RNA（水解RNA）

切除RNA（水解RNA）

；如果某RNA單鏈中一共有80個(gè)堿基，其中C有15個(gè)，A與U之和占該鏈堿基含量的40%，經(jīng)過(guò)以上若干過(guò)程后共獲得8個(gè)雙鏈DNA，此過(guò)程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為

384個(gè)

384個(gè)

（以上過(guò)程不考慮引物）。