轉(zhuǎn)基因小鼠的過(guò)表達(dá)模型和基因敲除模型在人類疾病機(jī)理與治療研究領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。研究表明，阿爾茨海默?。ˋD）發(fā)病與淀粉樣前體蛋白（APP）基因突變等有關(guān)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）通過(guò)

顯微注射

顯微注射

方法將APP基因?qū)胄∈笫芫阎?，即可獲得APP基因過(guò)表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠模型。
（2）sgRNA可識(shí)別與之互補(bǔ)配對(duì)的DNA片段，我們可利用

APP基因

APP基因

為模板設(shè)計(jì)sgRNA，再利用該sgRNA引導(dǎo)核酸內(nèi)切酶

切除APP基因

切除APP基因

，從而獲得APP基因敲除的轉(zhuǎn)基因小鼠模型。
（3）為證明已獲得APP基因敲除的轉(zhuǎn)基因小鼠，需提取出該轉(zhuǎn)基因小鼠的基因組DNA，并以

放射性標(biāo)記的APP基因

放射性標(biāo)記的APP基因

 作為探針，進(jìn)行DNA分子雜交。若

沒有出現(xiàn)雜交帶

沒有出現(xiàn)雜交帶

，則說(shuō)明已獲得APP基因敲除的轉(zhuǎn)基因小鼠。
（4）能否用抗原-抗體雜交的方法證明已獲得APP基因敲除的轉(zhuǎn)基因小鼠

否

否

。請(qǐng)說(shuō)明理由？
（5）經(jīng)研究得知，某DNA存在一個(gè)能控制轉(zhuǎn)錄過(guò)程的特殊區(qū)段，科學(xué)家通過(guò)PCR技術(shù)獲得了大量該區(qū)段。該技術(shù)操作流程的三個(gè)重要步驟是

變性、退火、延伸

變性、退火、延伸

；設(shè)計(jì)引物的前提是

需要知道該DNA部分核苷酸序列

需要知道該DNA部分核苷酸序列

；至少需經(jīng)過(guò)

三

三

次循環(huán)才能分離，得到所需要的DNA區(qū)段。
（6）目前，科學(xué)家正致力于應(yīng)用生物技術(shù)進(jìn)行一些疾病的治療，如器官移植。人體器官移植面臨的主要問(wèn)題有

供體器官短缺

供體器官短缺

和

免疫排斥

免疫排斥

，目前臨床通過(guò)

免疫抑制劑

免疫抑制劑

的應(yīng)用，通過(guò)抑制T細(xì)胞的增殖來(lái)提高器官移植的成活率。人們發(fā)現(xiàn)小型豬的器官可用來(lái)替代人體器官進(jìn)行移植，但小型豬器官表面的某些抗原決定蛋白仍可引起免疫排斥。目前，科學(xué)家正試圖利用基因工程對(duì)小型豬的器官進(jìn)行改造，在改造中導(dǎo)入小型豬基因組中的一些調(diào)節(jié)因子屬于基因工程中的

目的基因

目的基因

，作用是抑制

抗原決定基因

抗原決定基因

的表達(dá)。