干擾素是動(dòng)物體內(nèi)的一種蛋白質(zhì)，幾乎能抵抗所有病毒引起的感染，在新冠病毒的治療過程中起到了重要作用。此外，干擾素還用于治療乳腺癌、骨髓癌、淋巴癌等癌癥。傳統(tǒng)中的生產(chǎn)方法是從人體血液中的白細(xì)胞中提取，產(chǎn)量很低。用基因工程方法讓酵母菌生產(chǎn)人的干擾素，可以使產(chǎn)量大幅度提高?；卮鹣铝袉栴}：
（1）從人體白細(xì)胞中提取出全部的mRNA，并在

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

酶的作用下得到相應(yīng)的DNA片段，并將這些DNA片段分別與載體結(jié)合后，導(dǎo)入到不同的受體菌的群體中儲(chǔ)存，該過程構(gòu)建的基因文庫稱為

cDNA文庫（或部分基因文庫）

cDNA文庫（或部分基因文庫）

，該文庫中的目的基因在結(jié)構(gòu)上具有的特點(diǎn)是

不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子或不含啟動(dòng)子終止子和內(nèi)含子均可

不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子或不含啟動(dòng)子終止子和內(nèi)含子均可

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（2）基因工程的核心步驟是

構(gòu)建基因表達(dá)載體

構(gòu)建基因表達(dá)載體

，該步驟需要用限制酶PstⅠ切割質(zhì)粒和干擾素基因，已知PstⅠ識(shí)別的核苷酸序列以及切割位點(diǎn)為CTGCA^↓G，則PstⅠ切割干擾素基因和質(zhì)粒產(chǎn)生的黏性末端為

，可以用

E?coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶

E?coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶

（填“E?coli DNA連接酶”或“T₄DNA連接酶”或“E?coli DNA連接酶和T₄DNA連接酶”）將切割后的黏性末端縫合在一起。
（3）干擾素基因能否在酵母菌細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是

干擾素基因是否插入到了酵母菌細(xì)胞染色體的DNA上

干擾素基因是否插入到了酵母菌細(xì)胞染色體的DNA上

，檢測方法是

DNA分子雜交

DNA分子雜交

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（4）干擾素在體外保存相當(dāng)困難，但如果將其分子上一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸，那么在-70℃的條件下，可以保存半年。請(qǐng)根據(jù)蛋白質(zhì)工程的原理設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對(duì)干擾素進(jìn)行改造，使其保存時(shí)間延長。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路是

將基因中編碼半胱氨酸的堿基對(duì)序列替換成編碼絲氨酸的堿基對(duì)序列

將基因中編碼半胱氨酸的堿基對(duì)序列替換成編碼絲氨酸的堿基對(duì)序列

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