農桿菌是一種在土壤中生活的微生物，能在自然條件下侵染雙子葉植物和裸子植物，而對大多數(shù)單子葉植物沒有侵染能力。植物基因工程中常用含有重組Ti質粒的農桿菌和受體植物細胞的愈傷組織共培養(yǎng)，進行轉基因操作?，F(xiàn)有一段抗除草劑基因編碼蛋白質的區(qū)域在克隆載體上，要將其轉入棉花細胞，得到抗除草劑的轉基因棉花。
（1）在構建基因表達載體的過程中，要先用 限制酶限制酶對 目的基因目的基因和 運載體運載體進行切割，之后用 DNA連接DNA連接酶連接形成重組質粒。該過程中為保證目的基因以正確的方向與Ti質粒進行連接，科學家使用 22（填“1”或“2”）種限制酶。
（2）在以上重組質粒中，目的基因和抗卡那霉素抗性基因，都應該位于 T-DNAT-DNA片段內，因為 Ti質粒上只有T-DNA片段能夠整合到受體細胞的染色體DNA上Ti質粒上只有T-DNA片段能夠整合到受體細胞的染色體DNA上。
（3）將重組的Ti質粒轉入農桿菌可用 Ca2+Ca2+處理。得到的農桿菌菌液和棉花細胞愈傷組織共培養(yǎng)一段時間后，將愈傷組織置于含有 卡那霉素卡那霉素和除草劑的選擇培養(yǎng)基上進行組織培養(yǎng)，通過調整 生長素和細胞分裂素的比例生長素和細胞分裂素的比例，使其脫分化、再分化形成轉基因植株群體。
（4）除上述方法獲得抗除草劑的棉花，用物理或化學方法對大量正常棉花的 愈傷組織愈傷組織進行誘變處理，最終發(fā)現(xiàn)僅一株煙草（P）抗除草劑但同時花粉敗育。為保留抗除草劑特性，最快能在 F1F1（填“F1”或“F2”）中能獲得抗除草劑純合子植株。
【考點】植物的組織培養(yǎng)．
【答案】限制酶；目的基因；運載體；DNA連接；2；T-DNA；Ti質粒上只有T-DNA片段能夠整合到受體細胞的染色體DNA上；Ca2+；卡那霉素；生長素和細胞分裂素的比例；愈傷組織；F1
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：4引用：2難度：0.6
相似題
-
1．下列技術或方法與原理相符的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：23引用：8難度：0.7 -
2．下列各項培育植物新品種的過程中，不經過愈傷組織階段的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 4:30:1組卷：12引用：2難度：0.9 -
3．利用植物的莖尖或葉片、莖段、花藥、花粉等，在無菌條件下，培養(yǎng)在玻璃器皿中人工配制的培養(yǎng)基上，使它發(fā)育成完整的植株。這種技術可以用來培育植物新品種，可以在較短的時間內大量繁殖植物，還可以防止植物病毒的危害。下列關于這種技術的敘述，正確的是（ ?。?br />①這種技術利用了植物細胞的全能性②這種技術叫做組織培養(yǎng)，可以克隆生物體③這種技術屬于細胞工程的應用領域之一④這種技術是一種無性繁殖的方式。
發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：39引用：10難度：0.5
把好題分享給你的好友吧~~