新冠病毒(nCoV-2019)是冠狀病毒大家庭中的新的一員,其堿基序列與引起SARS的冠狀病毒堿基序列有79.5%的相似性,與流感病毒堿基相似度也較高,但nCoV-2019有部分特有序列?!皩?shí)時(shí)熒光定量RT-PCR”是新冠疫情防控的一把利刃,通常在1~2h內(nèi)即可得到檢測(cè)結(jié)果。TaqMan探針是實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)中一種常用探針(如圖1),其5'末端連接熒光基團(tuán)(R),3'末端連接淬滅劑(Q)。當(dāng)探針完整時(shí),R發(fā)出的熒光信號(hào)被Q吸收而不發(fā)熒光。在PCR擴(kuò)增過程中,當(dāng)Taq酶遇到探針時(shí)會(huì)使探針?biāo)舛尫懦鲇坞x的R和Q,R發(fā)出的熒光信號(hào)被相應(yīng)儀器檢測(cè)到,熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物數(shù)量完全同步(如圖2)?;卮鹣铝袉栴}:
(1)PCR技術(shù) 可以可以(填“可以”或“不可以“)用來獲取目的基因;PCR技術(shù)中Taq酶的適合溫度范圍是 50~90℃50~90℃。
(2)這種分子層面的熒光RT-PCR檢測(cè)具有特異性和靈敏性都很高的特點(diǎn),主要與試劑盒中的 引物引物、TaqMan探針TaqMan探針有關(guān)。
(3)在實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR過程中,通過熒光強(qiáng)度的變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)生量的變化從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖(如圖3)。最初數(shù)個(gè)循環(huán)里,熒光信號(hào)變化不大,設(shè)置為基線;之后進(jìn)入指數(shù)增長期,在這個(gè)時(shí)期設(shè)置一個(gè)熒光閾值線;Ct值是PCR擴(kuò)增過程中,擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)所經(jīng)過的擴(kuò)增循環(huán)次數(shù),則Ct值越小,起始模板量越 多多,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)起始模板的相對(duì)定量分析。若每分子探針?biāo)忉尫诺腞基團(tuán)熒光強(qiáng)度為定值a,則反應(yīng)體系中某時(shí)刻熒光信號(hào)強(qiáng)度(Rn)主要與 試劑盒中原料試劑盒中原料、引物和探針數(shù)量(Taq酶活性)引物和探針數(shù)量(Taq酶活性)有關(guān)。
(4)新冠病毒核酸檢測(cè)也存在一定的弊端,如交叉感染和假陽性等,請(qǐng)根據(jù)所學(xué)知識(shí)及題中資料分析防止出現(xiàn)假陽性的做法:新冠病毒堿基序列與引起SARS的冠狀病毒堿基序列有79.5%的相似性,與流感病毒堿基相似度也較高新冠病毒堿基序列與引起SARS的冠狀病毒堿基序列有79.5%的相似性,與流感病毒堿基相似度也較高。(答出2點(diǎn))
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】可以;50~90℃;引物;TaqMan探針;多;試劑盒中原料;引物和探針數(shù)量(Taq酶活性);新冠病毒堿基序列與引起SARS的冠狀病毒堿基序列有79.5%的相似性,與流感病毒堿基相似度也較高
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:2難度:0.5
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1.科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問題:
(1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
(2)PCR過程所依據(jù)的原理是
(3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為
(4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C.人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克?。?,可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6 -
2.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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