為探究M基因的功能，科研人員將克隆得到的M基因?qū)霐M南芥植株（自交繁殖），流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）通過過程a、b,采用

反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）

反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）

和

PCR

PCR

法來獲得大量的M基因，過程b中需先加熱至90～95℃然后冷卻至55～60℃，冷卻的目的是

使引物結(jié)合到互補DNA鏈上

使引物結(jié)合到互補DNA鏈上

。
（2）為獲得轉(zhuǎn)基因植物，采用

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

法侵染擬南芥的花序。基本過程如下：
①過程d：將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，其目的是

獲取大量重組質(zhì)粒（讓目的基因擴增）

獲取大量重組質(zhì)粒（讓目的基因擴增）

。
②過程e：將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌，再將含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌離心、富集，得到含有M基因的農(nóng)桿菌液。
③過程f：在擬南芥植株產(chǎn)生大量花序時，將其花表面部分在農(nóng)桿菌懸浮液中浸泡20～30s,3～4周后得到轉(zhuǎn)化擬南芥植株的種子（T₀）。浸泡之前，需先剪去已經(jīng)長成的角果（這些角果將來可發(fā)育成種子），原因是

這些已受精的角果將來結(jié)的種子是非轉(zhuǎn)基因的

這些已受精的角果將來結(jié)的種子是非轉(zhuǎn)基因的

。
④將收獲的擬南芥T₀種子，播種在含有

卡那霉素

卡那霉素

的培養(yǎng)基上，能健康生長的幼苗一般含有

M（目的）基因

M（目的）基因

。
（3）采用農(nóng)桿菌花序侵染的方法轉(zhuǎn)化，一般只能將目標(biāo)片段整合到一條DNA上。若要獲得M基因穩(wěn)定的突變體，需將

T₀代連續(xù)自交

T₀代連續(xù)自交

篩選出能穩(wěn)定遺傳的突變體。