乳酸菌是乳酸的傳統(tǒng)生產(chǎn)菌，但耐酸能力較差，影響產(chǎn)量。釀酒酵母耐酸能力較強(qiáng)，但不產(chǎn)生乳酸。研究者將乳酸菌的乳酸脫氫酶基因（LDH）導(dǎo)入釀酒酵母，獲得能產(chǎn)生乳酸的工程菌株。圖1為乳酸和乙醇發(fā)酵途徑示意圖，圖2為構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)所需的關(guān)鍵條件。
（1）乳酸菌發(fā)酵時(shí)，對(duì)氣體條件的要求是 無氧環(huán)境無氧環(huán)境，釀酒酵母的最適生長(zhǎng)溫度約為 28℃28℃。
（2）據(jù)圖2分析，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增LDH需要設(shè)計(jì)引物，引物的作用是 使DNA 聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA 聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，擴(kuò)增n次后，需要的引物1的數(shù)量至少是 2n-12n-1。研究發(fā)現(xiàn)，真核生物起始密碼子序列偏好ATG，為保證擴(kuò)增出的LDH以正確方向插入質(zhì)粒需要利用雙酶切技術(shù)，設(shè)計(jì)引物1的5′端序列時(shí)，應(yīng)考慮 包含BamHⅠ的識(shí)別序列；將GTG改為ATG包含BamHⅠ的識(shí)別序列；將GTG改為ATG。
（3）為了篩選出含重組質(zhì)粒的釀酒酵母，需要將重組質(zhì)粒導(dǎo)入 尿嘧啶合成酶基因突變（或不能合成尿嘧啶）尿嘧啶合成酶基因突變（或不能合成尿嘧啶）釀酒酵母菌株，在 不含尿嘧啶不含尿嘧啶的固體培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)基因釀酒酵母，并進(jìn)行鑒定。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】無氧環(huán)境；28℃；使DNA 聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；2n-1；包含BamHⅠ的識(shí)別序列；將GTG改為ATG；尿嘧啶合成酶基因突變（或不能合成尿嘧啶）；不含尿嘧啶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：21引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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