將乙型肝炎病毒表面抗原的基因插入酵母菌基因組中，使之在酵母菌細(xì)胞中充分表達(dá)，獲得的產(chǎn)物經(jīng)純化后可制成乙型肝炎疫苗。回答下列問題：
（1）獲取乙型肝炎病毒表面抗原基因的方法有多種，如可根據(jù)表面抗原蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測

氨基酸序列

氨基酸序列

，進(jìn)而推測目的基因的脫氧核苷酸序列，再進(jìn)行人工合成。目的基因合成后可在Taq酶的作用下通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，該技術(shù)的原理是

DNA復(fù)制

DNA復(fù)制

；擴(kuò)增前要根據(jù)一段已知目的基因的核苷酸序列合成

引物

引物

。
（2）目的基因在導(dǎo)入酵母菌細(xì)胞之前需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，該過程的工具酶有

限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶

限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶

?；虮磉_(dá)載體中RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位被稱為

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

。
（3）目的基因在受體細(xì)胞中是否翻譯出蛋白質(zhì)，可用

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

技術(shù)來檢測。若目的基因?qū)虢湍妇?xì)胞后未能穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，其原因可能是

目的基因未插入到酵母菌的染色體DNA中、目的基因未轉(zhuǎn)錄出mRNA、目的基因未翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)

目的基因未插入到酵母菌的染色體DNA中、目的基因未轉(zhuǎn)錄出mRNA、目的基因未翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)

（答出兩點(diǎn)即可）。
（4）實(shí)驗(yàn)證明，一定時(shí)間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好，其主要原因是

體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細(xì)胞數(shù)量增多，免疫預(yù)防作用強(qiáng)

體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細(xì)胞數(shù)量增多，免疫預(yù)防作用強(qiáng)

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