[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]
某種鏈霉菌可產(chǎn)生paim（多肽類化合物），該物質(zhì)是一種淀粉酶抑制劑，能使害蟲不能消化所攝取的淀粉而死亡。研究人員欲從這種鏈霉菌細(xì)胞中提取paim基因，并導(dǎo)入玉米等農(nóng)作物中，以獲取抗蟲作物。回答下列問(wèn)題：
（1）研究人員從這種鏈霉菌細(xì)胞中提取DNA，然后用多種限制酶同時(shí)切割DNA獲得很多種DNA片段。理論上，paim基因會(huì)存在于某一個(gè)或幾個(gè)DNA片段中。因此切割DNA時(shí)要用多種限制酶分別切割，而不是只用一種限制酶切割，或者用多種限制酶同時(shí)切割的原因是

既可獲得含paim基因的DNA片段，又能避免破壞paim基因的結(jié)構(gòu)完整性

既可獲得含paim基因的DNA片段，又能避免破壞paim基因的結(jié)構(gòu)完整性

。
（2）研究人員將上述DNA片段與質(zhì)粒結(jié)合，與DNA片段結(jié)合的質(zhì)粒需用同一種限制酶切割，其目的是

為 了獲得相同的黏性末端

為 了獲得相同的黏性末端

。常見(jiàn)的連接DNA片段與相應(yīng)質(zhì)粒片段的酶有

E.coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶

E.coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶

兩類。
（3）將上述過(guò)程得到的重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化，常見(jiàn)的操作方法是

鈣離子處理細(xì)胞，再將重組質(zhì)粒與受體細(xì)胞混合

鈣離子處理細(xì)胞，再將重組質(zhì)粒與受體細(xì)胞混合

?；蚬こ讨谐Ｓ梦⑸镒鳛槭荏w細(xì)胞，其優(yōu)點(diǎn)是

繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少

繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少

。
（4）檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大腸桿菌中是否產(chǎn)生了paim的檢測(cè)方法是

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

。我們將儲(chǔ)存有paim基因的大腸桿菌菌群稱為鏈霉菌的

cDNA

cDNA

文庫(kù)。