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凝乳酶是奶制品加工中經(jīng)常用到的一種酶,其傳統(tǒng)制備方法的產(chǎn)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足生產(chǎn)需要。科學(xué)家研究利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)凝乳酶,其部分環(huán)節(jié)如圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:
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(1)從剛出生5天的小牛皺胃組織中提取總RNA,經(jīng)
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
過(guò)程獲得總cDNA。通過(guò)PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性擴(kuò)增出凝乳酶基因,原因是
引物是根據(jù)凝乳酶基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的(或引物能與凝乳酶基因的cDNA 特異性結(jié)合)
引物是根據(jù)凝乳酶基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的(或引物能與凝乳酶基因的cDNA 特異性結(jié)合)
。
(2)過(guò)程①所使用的工具酶有
限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
。凝乳酶基因和質(zhì)粒上均有NdeⅠ和XhoⅠ兩種酶的識(shí)別序列,分別是-CATATG-,-CTCGAG-。用以上兩種酶分別切割目的基因和質(zhì)粒,得到的黏性末端分別為
-TATA和-AGCT-
-TATA和-AGCT-

(3)大腸桿菌作為凝乳酶基因受體細(xì)胞的主要優(yōu)點(diǎn)有
繁殖快、易培養(yǎng)、產(chǎn)量高,且遺傳物質(zhì)相對(duì)較少
繁殖快、易培養(yǎng)、產(chǎn)量高,且遺傳物質(zhì)相對(duì)較少
(至少答出兩點(diǎn))。用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,一般情況下,不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,原因是
未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱
未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱
。
(4)篩選出成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌,經(jīng)多代培養(yǎng)后,仍能從大腸桿菌中提取出凝乳酶基因。據(jù)此判斷,你認(rèn)為凝乳酶基因是否已在大腸桿菌中成功轉(zhuǎn)化?請(qǐng)說(shuō)明你的觀點(diǎn)及理由:
不能。理由是大腸桿菌中檢測(cè)到凝乳酶基因,說(shuō)明目的基因已經(jīng)成功導(dǎo)入大腸桿菌中,但不能說(shuō)明凝乳酶基因已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化
不能。理由是大腸桿菌中檢測(cè)到凝乳酶基因,說(shuō)明目的基因已經(jīng)成功導(dǎo)入大腸桿菌中,但不能說(shuō)明凝乳酶基因已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化
。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄;引物是根據(jù)凝乳酶基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的(或引物能與凝乳酶基因的cDNA 特異性結(jié)合);限制酶和DNA連接酶;-TATA和-AGCT-;繁殖快、易培養(yǎng)、產(chǎn)量高,且遺傳物質(zhì)相對(duì)較少;未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱;不能。理由是大腸桿菌中檢測(cè)到凝乳酶基因,說(shuō)明目的基因已經(jīng)成功導(dǎo)入大腸桿菌中,但不能說(shuō)明凝乳酶基因已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:1難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
  • 2.煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一,提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種,抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程(①~⑤)如圖所示?;卮鹣铝袉?wèn)題:
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項(xiàng))等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程
     
    (填序號(hào))。過(guò)程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過(guò)程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過(guò)程中,這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
  • 3.如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn),如圖為某種質(zhì)粒和目的基因,箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?,F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中,以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是(  )
    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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