心臟移植是挽救終末期心臟病患者生命唯一有效的手段，然而心臟移植過程中會發(fā)生缺血再灌注損傷（IRI），可能導致心臟壞死。研究發(fā)現(xiàn)，IRI通過促進Caspase8等一系列凋亡基因的表達，導致細胞凋亡壞死最終引起器官損傷。根據(jù)Caspase8基因合成的小干擾RNA（siRNA）可以使Gaspase8基因沉默，有效抑制IRI所致的器官損傷。圖1是利用豬的心肌細胞開展siRNA作用研究的示意圖。

回答下列問題：
（1）圖中步驟②構建重組質粒需要使用

限制酶、DNA連接酶

限制酶、DNA連接酶

等工具酶。與直接將siRNA導入豬的心肌細胞相比，通過重組質粒將siRNA對應的DNA序列導入心肌細胞，其優(yōu)點是

可持續(xù)產生siRNA，使靶基因長時間沉默

可持續(xù)產生siRNA，使靶基因長時間沉默

（答出一點）。
（2）siRNA對應DNA序列在心肌細胞中表達產生的siRNA，與RISC組裝形成基因沉默復合物，通過抑制基因表達的

翻譯

翻譯

過程，使Caspase8基因沉默，從而降低IRI引起的細胞凋亡。
（3）研究人員根據(jù)Caspase8基因的堿基序列，設計了三種序列分別導入豬的心肌細胞，通過測定靶基因Caspase8的mRNA含量來確定最優(yōu)序列。測定mRNA含量時，需提取心肌細胞的總RNA，經過

逆轉錄

逆轉錄

過程得到cDNA，再進行PCR擴增，測定PCR產物量，結果如圖2所示。據(jù)此判斷最優(yōu)序列是

序列2

序列2

。
（4）選用豬的心肌細胞做受體細胞是因為豬在基因、解剖結構、生理生化和免疫反應等方面與人類極為相似。為了解決心臟移植供體短缺問題，許多科學家正在研究用豬心臟代替人的心臟。你認為將豬心臟移植到人體面臨的最大挑戰(zhàn)是

免疫排斥反應

免疫排斥反應

，這是因為免疫系統(tǒng)會把外來器官當作

抗原（“非己”）

抗原（“非己”）

成分進行攻擊。請說出一種解決這一問題的思路：

可以利用基因工程技術將免疫排斥有關豬的抗原基因敲除或轉入一些人類特有蛋白的基因，將豬細胞偽裝人的細胞

可以利用基因工程技術將免疫排斥有關豬的抗原基因敲除或轉入一些人類特有蛋白的基因，將豬細胞偽裝人的細胞

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