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酵母菌絮凝是指菌體細(xì)胞間通過(guò)細(xì)胞壁相互粘附、聚集成團(tuán)的現(xiàn)象。適當(dāng)提高酵母菌的絮凝能力,有助于發(fā)酵結(jié)束時(shí)細(xì)胞和產(chǎn)物的分離,可大幅節(jié)約生產(chǎn)成本??蒲腥藛T利用基因工程改造酵母菌,使其絮凝能力提升。
(1)酵母菌的R基因?qū)π跄芰τ幸欢ǖ囊种谱饔?,圖1表示科研人員利用同源重組(在兩個(gè)DNA分子的同源序列之間直接交換的一種重組)基因敲除技術(shù)敲除R基因的過(guò)程。
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①研究人員將整合了lox序列的慶大霉素抗性基因?qū)虢湍妇?,lox-慶大霉素抗性基因通過(guò)同源重組的方式整合到酵母菌基因組中,重組片段上慶大霉素抗性基因的作用是
作為標(biāo)記基因,用于篩選出R基因敲除突變菌株
作為標(biāo)記基因,用于篩選出R基因敲除突變菌株

②利用含有慶大霉素的培養(yǎng)基獲得單菌落,再挑取單菌落進(jìn)行PCR擴(kuò)增,若要驗(yàn)證慶大霉素抗性基因是否替換R基因,則擴(kuò)增時(shí)選擇圖2中的引物是
引物1
引物1
引物6
引物6
,在PCR延伸階段中
耐高溫的DNA聚合酶
耐高溫的DNA聚合酶
催化脫氧核苷酸連接到引物的
3′
3′
端。
③給酵母菌導(dǎo)入PC質(zhì)粒,并將其置于添加
乳糖
乳糖
的培養(yǎng)基中,獲得敲除R基因且無(wú)慶大霉素抗性基因標(biāo)記的R菌。
(2)科研人員對(duì)野生菌株和R基因敲除菌株的酒精發(fā)酵能力和絮凝能力進(jìn)行了測(cè)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,獲得了R基因敲除且不影響酒精發(fā)酵能力的符合人類(lèi)生產(chǎn)需求的菌株。請(qǐng)?jiān)趫D3中依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

【答案】作為標(biāo)記基因,用于篩選出R基因敲除突變菌株;引物1;引物6;耐高溫的DNA聚合酶;3′;乳糖
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:30引用:1難度:0.5
相似題
  • 1.目前,科學(xué)家已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類(lèi)藥物.下列與之相關(guān)的說(shuō)法,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:5引用:1難度:0.9
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進(jìn)展.
    (1)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時(shí),必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運(yùn)載體有
     
     
    、
     
    等,而作為運(yùn)載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進(jìn)行篩選.進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí),通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時(shí),應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細(xì)胞中特異性表達(dá).
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血?jiǎng)谂R床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動(dòng)物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達(dá)載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問(wèn)題:
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    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴(kuò)增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱(chēng)),擴(kuò)增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動(dòng)子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達(dá)載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長(zhǎng)出了多個(gè)大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     
    。
    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過(guò)
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細(xì)胞內(nèi),通過(guò)培養(yǎng)即可獲得能表達(dá)人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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