科研人員通過PCR獲得肝細(xì)胞特異性啟動(dòng)子——白蛋白啟動(dòng)子,將該啟動(dòng)子與Cre重組酶基因結(jié)合構(gòu)建表達(dá)載體,培育出在肝細(xì)胞特異性表達(dá)Cre重組酶的轉(zhuǎn)基因小鼠,請(qǐng)回答下列問題:
(1)PCR的全稱是 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),其原理是體外DNA雙鏈復(fù)制。與體內(nèi)DNA復(fù)制相比,PCR技術(shù)的特點(diǎn):一方面復(fù)制次數(shù)不受細(xì)胞分裂次數(shù)的限制,可在短時(shí)間里大量復(fù)制DNA;另一方面 只復(fù)制目的基因片段(兩引物之間的DNA片段)只復(fù)制目的基因片段(兩引物之間的DNA片段)。
(2)構(gòu)建表達(dá)載體是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體除啟動(dòng)子、目的基因(Cre重組酶基因)外,還包括 標(biāo)記基因和終止子標(biāo)記基因和終止子。檢測(cè)轉(zhuǎn)基因小鼠的染色體DNA上是否插入Cre重組酶基因,從分子水平考慮,檢測(cè)方法是采用 DNA 分子雜交技術(shù)DNA 分子雜交技術(shù)。
(3)基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞時(shí),常選用受精卵的原因是 受精卵的全能性高,易發(fā)育成個(gè)體受精卵的全能性高,易發(fā)育成個(gè)體。
(4)轉(zhuǎn)基因小鼠的培育過程中還需要胚胎移植技術(shù),該技術(shù)的實(shí)質(zhì)是 早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移;轉(zhuǎn)基因小鼠培育成功的標(biāo)志是 肝細(xì)胞內(nèi)能特異性表達(dá)Cre重組酶肝細(xì)胞內(nèi)能特異性表達(dá)Cre重組酶。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);只復(fù)制目的基因片段(兩引物之間的DNA片段);標(biāo)記基因和終止子;DNA 分子雜交技術(shù);受精卵的全能性高,易發(fā)育成個(gè)體;早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移;肝細(xì)胞內(nèi)能特異性表達(dá)Cre重組酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:2難度:0.7
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