Cre-loxP系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特定基因的敲除,其技術(shù)過程如圖1所示??茖W(xué)家把幾種熒光蛋白基因和Cre酶能識(shí)別并切割的序列(loxP1和loxP2)串在一起,構(gòu)建如圖2所示的表達(dá)載體T,在Cre酶的作用下,一部分熒光蛋白基因會(huì)被隨機(jī)地“剪掉”,而剩下的部分得以表達(dá),這樣就可以隨機(jī)呈現(xiàn)不同的顏色。這種利用熒光蛋白“點(diǎn)亮”神經(jīng)元的大腦成像技術(shù)被稱為“腦彩虹”,能幫助科學(xué)家了解大腦。
(1)loxP序列具有方向性,結(jié)構(gòu)如圖1所示,其中決定方向的序列是 ②②(填序號(hào))。
(2)構(gòu)建表達(dá)載體T需要用到限制酶和DNA連接限制酶和DNA連接酶,用顯微注射顯微注射法將表達(dá)載體T導(dǎo)入小鼠的受精卵受精卵細(xì)胞中,經(jīng)篩選后獲得細(xì)胞中含一個(gè)表達(dá)載體T的轉(zhuǎn)基因小鼠a(不含Cre酶)。小鼠a的腦組織細(xì)胞和其他組織細(xì)胞的色彩分別是 紅色紅色和 無色無色。
(3)已知兩個(gè)loxrP1之間或兩個(gè)loxP2之間的基因,最多會(huì)被Cre酶敲除一次。研究者將Cre酶基因與病毒基因重組構(gòu)建Cre病毒,然后將Cre病毒注入細(xì)胞中含一個(gè)表達(dá)載體T的轉(zhuǎn)基因小鼠A體內(nèi),出現(xiàn)“腦彩虹”現(xiàn)象,小鼠A的一個(gè)腦細(xì)胞的色彩為 紅色或黃色或藍(lán)色紅色或黃色或藍(lán)色。
(4)利用上述技術(shù)可以培育能夠在一個(gè)細(xì)胞內(nèi)隨機(jī)出現(xiàn)兩種顏色的“腦彩虹”小鼠,請(qǐng)依據(jù)題目信息,簡要寫出設(shè)計(jì)思路。設(shè)法使小鼠腦組織細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)相同表達(dá)載體T,Cre酶對(duì)每個(gè)DNA片段隨機(jī)剪切,因而細(xì)胞的顏色由細(xì)胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色隨機(jī)出現(xiàn)決定設(shè)法使小鼠腦組織細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)相同表達(dá)載體T,Cre酶對(duì)每個(gè)DNA片段隨機(jī)剪切,因而細(xì)胞的顏色由細(xì)胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色隨機(jī)出現(xiàn)決定。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】②;限制酶和DNA連接;顯微注射;受精卵;紅色;無色;紅色或黃色或藍(lán)色;設(shè)法使小鼠腦組織細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)相同表達(dá)載體T,Cre酶對(duì)每個(gè)DNA片段隨機(jī)剪切,因而細(xì)胞的顏色由細(xì)胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色隨機(jī)出現(xiàn)決定
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:79引用:2難度:0.3
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