2019年末，一場突如其來的新冠肺炎疫情打亂了人們正常的生活節(jié)奏。2020年1月6日，中國疾控中心分離出第一株新冠病毒；1月7日完成對該病毒的全部基因組測序；1月24日首個針對新冠病毒的核酸檢測試劑盒通過審核，為新冠肺炎的診斷提供了有力的保障。新冠病毒是一種單股正鏈RNA病毒，外面包裹著衣殼蛋白和囊膜，囊膜上存在刺突蛋白，能特異性識別細胞膜上的ACE2受體從而感染細胞。新冠病毒進入細胞后，首先以正鏈RNA為模板翻譯出RNA聚合酶，然后在該酶的作用下合成負鏈RNA，再以負鏈RNA為模板合成大量的正鏈RNA或結構蛋白mRNA。
（1）核酸檢測多數(shù)采用實時熒光RT-PCR法。由于新冠病毒的遺傳物質(zhì)為RNA，在進行PCR之前，應該將樣本中的病毒RNA提取出來，在逆（反）轉錄逆（反）轉錄酶的作用下合成互補的DNA單鏈（該過程稱為RT）。PCR過程需要加入引物，原因是DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從3′端延伸DNA鏈DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從3′端延伸DNA鏈。2020年1月24日，中國疾控中心公布了針對新冠病毒核酸不同序列設計的引物，其中針對衣殼蛋白基因的一段引物Ⅰ為GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT，能否依據(jù)此序列設計出另一段引物Ⅱ的序列？不能不能，理由是兩段引物的堿基序列沒有相關性（既不相同，也不互補；或其他合理答案）兩段引物的堿基序列沒有相關性（既不相同，也不互補；或其他合理答案）。與傳統(tǒng)PCR相比，熒光RT-PCR過程中加入了熒光探針，可通過熒光信號對PCR進程實時檢測，PCR產(chǎn)物越多，熒光越強。如果待測樣本中沒有檢測出熒光，初步斷定樣本中不含有不含有（填“含有”或“不含有”）新冠病毒。
（2）由于核酸檢測比較費時費力，現(xiàn)已開發(fā)出多款針對新冠病毒的抗原或抗體檢測試劑盒，可在更短時間內(nèi)得出檢測結果。假如你是一名科研人員，現(xiàn)提供新冠病毒刺突蛋白基因、能產(chǎn)生專一針對新冠病毒抗體的B細胞及其它相關的生物學材料，請運用現(xiàn)代生物技術，設計一款能夠快速大規(guī)模生產(chǎn)、針對新冠病毒抗原或抗體檢測的試劑盒，簡要寫出生產(chǎn)試劑盒的設計思路（只寫出針對抗原或抗體檢測的一種方案即可）。
（3）在對新冠病毒檢測的過程中，偶爾會出現(xiàn)核酸檢測陽性而抗體檢測陰性的現(xiàn)象，假如這兩種試劑盒的質(zhì)量及檢測方法都沒有問題，試從免疫角度分析造成這種現(xiàn)象可能的原因新冠病毒雖感染機體，但機體沒來得及產(chǎn)生相應的抗體（或產(chǎn)生的抗體數(shù)量太少）新冠病毒雖感染機體，但機體沒來得及產(chǎn)生相應的抗體（或產(chǎn)生的抗體數(shù)量太少）。
（4）2020年2月15日，法維拉韋正式獲得國家藥監(jiān)局批準上市，成為我國第一個針對新冠肺炎具有潛在療效的藥物，該藥物能夠專一抑制新冠病毒RNA聚合酶，由于人體細胞內(nèi)也存在RNA聚合酶，有人擔心該藥物的安全性，請分析他的擔心有無道理？沒有道理沒有道理，理由是因為新冠病毒的RNA聚合酶催化以RNA為模板的生理過程，而人體細胞內(nèi)的RNA聚合酶催化以DNA為模板的生理過程，二者不是同一種酶，因此法維拉韋不會抑制人體細胞內(nèi)RNA聚合酶的活性。因為新冠病毒的RNA聚合酶催化以RNA為模板的生理過程，而人體細胞內(nèi)的RNA聚合酶催化以DNA為模板的生理過程，二者不是同一種酶，因此法維拉韋不會抑制人體細胞內(nèi)RNA聚合酶的活性。。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定；目的基因的篩選與獲取．
【答案】逆（反）轉錄；DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從3′端延伸DNA鏈；不能；兩段引物的堿基序列沒有相關性（既不相同，也不互補；或其他合理答案）；不含有；新冠病毒雖感染機體，但機體沒來得及產(chǎn)生相應的抗體（或產(chǎn)生的抗體數(shù)量太少）；沒有道理；因為新冠病毒的RNA聚合酶催化以RNA為模板的生理過程，而人體細胞內(nèi)的RNA聚合酶催化以DNA為模板的生理過程，二者不是同一種酶，因此法維拉韋不會抑制人體細胞內(nèi)RNA聚合酶的活性。
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：35引用：2難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術不僅可以擴增目的基因，還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設計突變上游引物，突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增，得到突變目的基因序列。回答下列問題：
（1）PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該PCR擴增技術所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術的優(yōu)點是。
（3）如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導入馬鈴薯細胞，將馬鈴薯細胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細胞中轉錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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