近日全國(guó)多地爆發(fā)甲型流感，其中又以甲型H1N1流感為主，病原體為一種新型的甲型H1N1流感病毒，患者常表現(xiàn)出畏寒、發(fā)熱，頭痛等癥狀，某科研團(tuán)隊(duì)欲研究HIN1病毒表面的抗原蛋白A以生產(chǎn)治療甲型流感的抗體，請(qǐng)回答下列問題：
（1）H1N1流感病毒是一種RNA病毒，科研人員研究制備重組H1N1流感疫苗的過程如圖1，過程③代表PCR過程，其原理是 DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制，為了便于擴(kuò)增的A蛋白基因片段與腺病毒載體連接，需要在引物的 5′5′（填“3′”或“5′”）端加上限制酶切位點(diǎn)，設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間由于 堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)而造成引物自連。過程④需要的工具酶是 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶。
（2）科研人員準(zhǔn)備繼續(xù)制備抗A蛋白的單克隆抗體，如圖2所示，過程⑥可用動(dòng)物細(xì)胞特有的 滅活病毒誘導(dǎo)滅活病毒誘導(dǎo)法誘導(dǎo)細(xì)胞融合，過程⑦需要進(jìn)行 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，乙的特點(diǎn)是 既可以大量增殖，又能產(chǎn)生所需的特定抗體既可以大量增殖，又能產(chǎn)生所需的特定抗體。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】DNA半保留復(fù)制；5′；堿基互補(bǔ)配對(duì)；限制酶、DNA連接酶；滅活病毒誘導(dǎo)；克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；既可以大量增殖，又能產(chǎn)生所需的特定抗體
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：7引用：2難度：0.5
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因，還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物，得到兩個(gè)常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物，突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該P(yáng)CR擴(kuò)增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是。
（3）如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)經(jīng)過的兩個(gè)過程是。檢測(cè)目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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