全面接種新冠疫苗可有效防止新冠病毒的大規(guī)模傳染。新冠疫苗有多種類型,如滅活疫苗、重組疫苗、mRNA疫苗等。重組疫苗的研發(fā)可以利用腺病毒作為載體。請回答下列問題:
(1)新冠病毒依賴其表面的S蛋白與宿主細(xì)胞膜上ACE2受體結(jié)合而最終實(shí)現(xiàn)感染。ACE2受體的化學(xué)本質(zhì)是 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)。該結(jié)合過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜 信息交流信息交流功能。
(2)新冠病毒是一種RNA病毒。研制疫苗時,需利用RT-PCR技術(shù)獲取S蛋白基因,該過程除逆轉(zhuǎn)錄酶外,還有 熱穩(wěn)定DNA聚合酶熱穩(wěn)定DNA聚合酶酶參與,此酶需要 Mg2+Mg2+(離子)的激活。PCR的最后一個循環(huán)結(jié)束后通常還需要在72℃維持7min左右,其目的是 使子鏈充分延伸使子鏈充分延伸
(3)腺病毒是一種DNA病毒,基因組中的E基因與其復(fù)制有關(guān)。將其作為運(yùn)載S蛋白基因的載體時,需對腺病毒進(jìn)行的改造是 敲除E基因敲除E基因,以提高該種新冠疫苗的安全性。
(4)接種滅活疫苗一般需2~3次,而接種重組DNA疫苗一般只需1次,根據(jù)疫苗作用原理和人體特異性免疫反應(yīng)機(jī)制分析,可能的原因是 可在人體內(nèi)持續(xù)表達(dá)S蛋白,誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和記憶細(xì)胞可在人體內(nèi)持續(xù)表達(dá)S蛋白,誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和記憶細(xì)胞。
(5)在基因組中敲除并整合基因,其技術(shù)流程通常如圖1所示。
①利用大腸桿菌DNA進(jìn)行PCR,無需從細(xì)胞中提取DNA,可在培養(yǎng)出菌落后直接挑取菌落進(jìn)行,分析其原因是 PCR變性時的高溫可使細(xì)菌細(xì)胞膜失去選擇透過性PCR變性時的高溫可使細(xì)菌細(xì)胞膜失去選擇透過性,DNA得以釋放。
②利用PCR獲得對應(yīng)產(chǎn)物的關(guān)鍵是 引物引物設(shè)計(jì)。
③PCR5時需要加入的引物是 C1+B2C1+B2。
④利用電泳技術(shù)鑒定PCR產(chǎn)物,結(jié)果如圖2。其中陽性泳道使用的樣品是熒光基因M,可與待測泳道中DNA進(jìn)行對比;標(biāo)準(zhǔn)泳道使用的樣品是不同已知長度(大?。┑腄NA片段,作用是 便于確定待測泳道中DNA的長度便于確定待測泳道中DNA的長度。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】蛋白質(zhì);信息交流;熱穩(wěn)定DNA聚合酶;Mg2+;使子鏈充分延伸;敲除E基因;可在人體內(nèi)持續(xù)表達(dá)S蛋白,誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和記憶細(xì)胞;PCR變性時的高溫可使細(xì)菌細(xì)胞膜失去選擇透過性;引物;C1+B2;便于確定待測泳道中DNA的長度
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/9/9 4:0:8組卷:9引用:2難度:0.6
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1.科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因(SLA-2基因),構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體,進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實(shí)驗(yàn)的主要流程如圖1,SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點(diǎn)后的數(shù)字表示距復(fù)制原點(diǎn)的距離。請回答:
限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
(2)過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是
(3)若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳,請?jiān)诖痤}紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
(4)科研中常用呤霉素對真核細(xì)胞進(jìn)行篩選,一般選擇最低致死濃度的前一個濃度作為篩選濃度的原因是:既可以讓大部分沒有抗性的細(xì)胞死亡又不會讓
(5)過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細(xì)胞生產(chǎn)的抗原肽,其原理是發(fā)布:2024/12/15 6:30:1組卷:41引用:3難度:0.6 -
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3.下列關(guān)于“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn),說法錯誤的是( ?。?/h2>
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