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菁優(yōu)網(wǎng)現(xiàn)代生物技術在醫(yī)藥領域有廣泛應用。將人體中B蛋白基因?qū)氪竽c桿菌,以生產(chǎn)藥物B蛋白?;卮鹣铝袉栴}:
(1)將B蛋白基因?qū)氪竽c桿菌,不能直接從人類基因文庫中獲取B蛋白基因,原因是
人體基因的轉(zhuǎn)錄初始產(chǎn)物需切除部分序列,才能加工成為成熟的mRNA,大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng),B蛋白基因無法正常表達
人體基因的轉(zhuǎn)錄初始產(chǎn)物需切除部分序列,才能加工成為成熟的mRNA,大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng),B蛋白基因無法正常表達
。
(2)為獲取B蛋白基因,需要在人體細胞內(nèi)提取的
mRNA
mRNA
經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA,cDNA中
不含
不含
(填“含有”或“不含”)內(nèi)含子序列。利用PCR技術擴增目的基因時,a和b表示兩種引物,這兩種引物的堿基序列不能互補,原因是
a和b引物若能互補會發(fā)生配對,從而會減弱與目的基因的結(jié)合
a和b引物若能互補會發(fā)生配對,從而會減弱與目的基因的結(jié)合
。
(3)導入過程所用載體pUC19質(zhì)粒如圖所示,LacZ基因表達產(chǎn)物能水解X-gal,使菌落呈藍色,不能水解X-gal的菌落呈白色。已知三種限制性核酸內(nèi)切酶X、Y、Z所識別的序列分別是C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC(↓表示剪切點)。為便于篩選導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應選用
酶Y和DNA連接
酶Y和DNA連接
酶將該質(zhì)粒與目的基因構(gòu)建為重組質(zhì)粒,并且在培養(yǎng)基中加入
氨芐青霉素、X-gal
氨芐青霉素、X-gal
,接種培養(yǎng)后選擇
色菌落。
(4)篩選得到成功導入B蛋白基因的大腸桿菌菌株,為檢驗B蛋白基因是否表達,可以用含放射性標記的B蛋白基因單鏈作為探針,檢測受體菌有無
成功轉(zhuǎn)錄(合成相應RNA)
成功轉(zhuǎn)錄(合成相應RNA)
。

【答案】人體基因的轉(zhuǎn)錄初始產(chǎn)物需切除部分序列,才能加工成為成熟的mRNA,大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng),B蛋白基因無法正常表達;mRNA;不含;a和b引物若能互補會發(fā)生配對,從而會減弱與目的基因的結(jié)合;酶Y和DNA連接;氨芐青霉素、X-gal;白;成功轉(zhuǎn)錄(合成相應RNA)
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:21引用:1難度:0.6
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    發(fā)布:2024/12/18 14:0:2組卷:29引用:5難度:0.7
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