葉盤(pán)轉(zhuǎn)化法是Horsch等人于1985年發(fā)展起來(lái)的一種轉(zhuǎn)化法，以培育轉(zhuǎn)基因耐鹽毛白楊為例，操作程序是先將毛白楊葉子表面進(jìn)行消毒，再用消毒過(guò)的打孔器從葉子上取下圓形小片，即葉盤(pán)。然后進(jìn)行下列操作，請(qǐng)回答：
（1）毛白楊葉盤(pán)與重組農(nóng)桿菌共培養(yǎng)以進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化：農(nóng)桿菌能夠介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的原因是

含有的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上

含有的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上

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（2）脫分化和篩選培養(yǎng)：葉盤(pán)接種在含卡那霉素的培養(yǎng)基上，卡那霉素的作用是

篩選出被重組農(nóng)桿菌感染的葉盤(pán)

篩選出被重組農(nóng)桿菌感染的葉盤(pán)

，作為運(yùn)載體的Ti質(zhì)粒應(yīng)含有

卡那霉素抗性

卡那霉素抗性

基因，運(yùn)載體上的

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)。
（3）獲得抗性植株：葉盤(pán)周?chē)L(zhǎng)出愈傷組織后分別轉(zhuǎn)移到誘導(dǎo)“生芽”和“生根”的培養(yǎng)基中，此過(guò)程培養(yǎng)基中加入的植物激素主要是

生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素

生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素

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（4）耐鹽基因的檢測(cè)與鑒定：
①分子水平：可采用

抗原—抗體雜交

抗原—抗體雜交

的方法來(lái)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因毛白楊提取液中有無(wú)相應(yīng)的耐鹽蛋白。
②個(gè)體水平：請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)個(gè)體水平檢測(cè)方案

將轉(zhuǎn)基因毛白楊種植在鹽堿地中觀察其生長(zhǎng)狀況

將轉(zhuǎn)基因毛白楊種植在鹽堿地中觀察其生長(zhǎng)狀況

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