蒂蛀蟲是荔枝的重要蟲害,荔枝嫩葉受蛀時,中脈變褐色,干枯破裂;花穗受害,頂端枯死;果實被蛀,造成落果或品質下降??蒲腥藛T利用轉基因抗蟲荔枝的研究過程中,采用了圖示質粒,其上有SalⅠ,HindⅢ和BamHⅠ三種限制酶切割位點。
(1)在構建重組質粒時,選用 SalⅠ、HindⅢSalⅠ、HindⅢ兩種限制酶切割目的基因的兩端及質粒,可防止 目的基因和質粒的自我環(huán)化或反向連接目的基因和質粒的自我環(huán)化或反向連接。
(2)用分別含有氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選農桿菌時,發(fā)現含有目的基因的農桿菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長,這說明 抗四環(huán)素基因被破壞抗四環(huán)素基因被破壞。
(3)采用農桿菌感染荔枝細胞的優(yōu)點是:農桿菌的Ti質粒含有一段T—DNA,能攜帶目的基因進入受體細胞,并將目的基因整合到受體細胞染色體的DNA上農桿菌的Ti質粒含有一段T—DNA,能攜帶目的基因進入受體細胞,并將目的基因整合到受體細胞染色體的DNA上。
(4)利用植物組織培養(yǎng)技術培育轉基因抗蟲荔枝植株,依據的原理是 植物細胞的全能性植物細胞的全能性。
(5)導入抗蟲基因的荔枝是否可以表達其遺傳特性,可利用 PCRPCR技術檢測抗蟲基因是否轉錄出mRNA,是否翻譯出與抗蟲有關的蛋白質則采用 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交技術,除上述分子水平檢測外,還需進行個體水平上的抗蟲性狀鑒定,可用的方法是 用轉基因荔枝嫩葉喂養(yǎng)蒂蛀蟲,觀察蒂蛀蟲的存活情況用轉基因荔枝嫩葉喂養(yǎng)蒂蛀蟲,觀察蒂蛀蟲的存活情況。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】SalⅠ、HindⅢ;目的基因和質粒的自我環(huán)化或反向連接;抗四環(huán)素基因被破壞;農桿菌的Ti質粒含有一段T—DNA,能攜帶目的基因進入受體細胞,并將目的基因整合到受體細胞染色體的DNA上;植物細胞的全能性;PCR;抗原—抗體雜交;用轉基因荔枝嫩葉喂養(yǎng)蒂蛀蟲,觀察蒂蛀蟲的存活情況
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/10 8:0:9組卷:6引用:2難度:0.5
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