瓊脂是一種多糖類物質(zhì)，由于很少有微生物能將其降解而成為配制固體培養(yǎng)基常用的凝固劑之一。某實(shí)驗(yàn)室在處理一批已充分進(jìn)行過微生物培養(yǎng)的廢棄固體培養(yǎng)基上發(fā)現(xiàn)：培養(yǎng)基上的微生物幾乎全部死亡，但在其中一個(gè)培養(yǎng)基上存在一個(gè)正常生長的細(xì)菌菌落。該實(shí)驗(yàn)室研究人員對此提出以下幾種假說：①此培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)未消耗殆盡；②該種細(xì)菌能利用瓊脂；③形成此菌落的是自養(yǎng)微生物。
（1）假說①中的“營養(yǎng)”最可能指的是

碳源

碳源

（填“碳源”“氮源”或“無機(jī)鹽”）。
（2）在配制以上固體培養(yǎng)基時(shí)，配制的順序是：稱量→溶解→調(diào)pH→定容→

滅菌

滅菌

→倒平板。
（3）最終通過實(shí)驗(yàn)證明假說②是正確的，并且發(fā)現(xiàn)該瓊脂分解菌能分泌脫色酶，分解糖蜜發(fā)酵廢液的黑褐色色素。
①欲從獲得的菌種中分離出分解黑褐色色素能力強(qiáng)的細(xì)菌，可在培養(yǎng)基中加入

從糖蜜發(fā)酵廢液中提取到的黑褐色色素（發(fā)酵液）

從糖蜜發(fā)酵廢液中提取到的黑褐色色素（發(fā)酵液）

，采用

平板劃線（或稀釋涂布平板）

平板劃線（或稀釋涂布平板）

法完成接種。適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，發(fā)現(xiàn)菌落周圍形成圓形凹穴和透明圈，形成的原因是

瓊脂分解菌分解瓊脂產(chǎn)生凹穴，分解黑褐色色素產(chǎn)生透明圈

瓊脂分解菌分解瓊脂產(chǎn)生凹穴，分解黑褐色色素產(chǎn)生透明圈

；應(yīng)選擇

透明圈大

透明圈大

的菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。
②由于該菌種在自然界中極為稀少，欲長期保存該菌種，可以采用

甘油管藏

甘油管藏

法。在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌，然后將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在溫度為

-20℃

-20℃

的冷凍箱中保存。