1965年中國(guó)科學(xué)家人工合成了具有生物活性的結(jié)晶牛胰島素,摘取了人工合成蛋白質(zhì)的桂冠。此后科學(xué)家又提出了利用基因工程改造大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素的兩種方法:AB法是根據(jù)胰島素 A、B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種DNA片段,利用工程菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素;BCA 法是利用胰島B細(xì)胞中的mRNA 得到胰島素基因,導(dǎo)入工程菌獲得胰島素。這兩種方法使用同一種質(zhì)粒作為載體。回答下列問(wèn)題。
(1)AB法中人工合成的兩種DNA片段均有多種可能的序列的原因是 密碼子具有簡(jiǎn)并性,密碼子具有簡(jiǎn)并性,。 AB和BCAAB和BCA(填“AB“、“BCA“或“AB和 BCA“)法獲取的目的基因中不含人胰島素基因啟動(dòng)子。
(2)圖中是利用基因工程生產(chǎn)人胰島素過(guò)程中使用的質(zhì)粒及目的基因的部分結(jié)構(gòu)。為使目的基因與載體正確連接,在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)可添加限制酶 XhoⅠ和MunⅠXhoⅠ和MunⅠ的識(shí)別序列。通過(guò)上述方法獲得人的胰島素基因后,需要通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,已知胰島素基因左端①處的堿基序列為-CCTTTCAGCTCA-,則其中一種引物設(shè)計(jì)的序列是5′-CTCGAGCCTTTCAGCTCACTCGAGCCTTTCAGCTCA-3′。
(3)β一半乳糖苷酶可以分解無(wú)色的X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,否則菌落為白色。據(jù)此簡(jiǎn)述篩選工程菌的過(guò)程 經(jīng)鈣離子處理的大腸桿菌與重組質(zhì)?;旌吓囵B(yǎng)一段時(shí)間后,再將大腸桿菌接種到添加了氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上篩選出白色的菌落即為工程菌經(jīng)鈣離子處理的大腸桿菌與重組質(zhì)粒混合培養(yǎng)一段時(shí)間后,再將大腸桿菌接種到添加了氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上篩選出白色的菌落即為工程菌。
(4)科學(xué)家利用蛋白質(zhì)工程技術(shù),研制出了賴脯胰島素,與天然胰島素相比,其皮下注射后易吸收、起效快。寫(xiě)出獲取賴脯胰島素基因的流程:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)于的脫氧核苷酸序列從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)于的脫氧核苷酸序列。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】密碼子具有簡(jiǎn)并性,;AB和BCA;XhoⅠ和MunⅠ;CTCGAGCCTTTCAGCTCA;經(jīng)鈣離子處理的大腸桿菌與重組質(zhì)粒混合培養(yǎng)一段時(shí)間后,再將大腸桿菌接種到添加了氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上篩選出白色的菌落即為工程菌;從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)于的脫氧核苷酸序列
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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